重慶正規(guī)RNA提取試劑進貨價

來源: 發(fā)布時間:2024-04-26

動物細胞RNA提?。?、懸浮細胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側,從而限制沉淀內部的細胞與裂解液的接觸,從而導致細胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細胞吹下來,轉移到無RNA酶的EP管中,加裂解液進行提取。3、貼壁細胞:需要先用胰酶消化,然后收集到無RNA酶的EP管中,離心去其上清,用PBS洗1~2次,去除多余的胰酶,以適量PBS重懸后繼續(xù)進行提取步驟。細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA。重慶正規(guī)RNA提取試劑進貨價

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細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:1.有效分離和提取細胞質RNA,與細胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質高,產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含MicroRNA)。5.純化的RNA可用于任何應用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細胞質RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達譜研究中,較好能夠提取成熟的細胞質(Cytoplasmic)RNA?;蛘?,在研究分析未剪接的RNA前體時,提取細胞核(Nuclear)RNA會是一個更好的選擇。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細胞質與細胞核的RNA,不僅費用高昂,而且浪費大量的材料與時間。天津RNA提取試劑他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到較低程度。

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RNA提取注意事項:1、組織樣本要盡可能的新鮮,避免反復凍融。2、提取時組織要充分研磨,組織量不宜過少,更不宜過多。3、加入裂解液后應給予充分的孵育時間,使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,不能多吸”,千萬不能提取到中間層,否則會導致嚴重的基因組DNA污染。5、洗滌時洗滌液應充分浸潤到管壁的四周,確保洗滌徹底。6、柱式提取法,洗滌完后除了對柱子進行空離后,還應當將吸附柱置于超凈臺內吹風5~10min,使有機溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時候,當加入DEPC水后還應孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應當給予適當溶解時間,并用泵頭不斷吹吸離心管底部。

總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗。是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。

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石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的MRL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高~RNA提取試劑注意事項:必須戴一次性手套操作。重慶正規(guī)RNA提取試劑進貨價

能迅速破碎細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶。重慶正規(guī)RNA提取試劑進貨價

RNA提取關鍵點病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性,在提取時,實驗人員需要佩戴口罩和手套等各種防護裝備,以防實驗室污染。而有種「自動滅活」的方法,在更加便利的同時,也能更好的保護實驗人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase,這種酶也會加速RNA的降解。為了使這種酶對降解的影響較小化,較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的RNA。這種情況下,可以在裂解緩沖液中立即進行溶解。比如可以通過TRIzol?、RNA裂解緩沖液等使RNase失活,然后再處理樣本。另外,再采集樣本之后馬上加入DNA/RNAShield,可以快速降解掉RNase等蛋白物質。當然,DNA/RNAShield也會保證取樣時微生物基因多樣性不會發(fā)生改變。重慶正規(guī)RNA提取試劑進貨價