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PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例，均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸（HIO）溶于100mL蒸餾水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：過碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸鈉0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液（Schiff氏液）在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL，煮沸后，在保持微沸的情況下，加入堿性品紅2.5g，并不斷搖動約5min（勿使之沸騰），使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。冷卻到50℃時，過濾，加入1N鹽酸50mL，再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g，塞住瓶口，搖動容器以充分混合（此時顏色明顯變淡），然后避光放置或冰箱內(nèi)24h遇醋酸發(fā)生沉淀，胃粘蛋白則除外。提供糖原染色試劑盒哪里買

糖原染色：1、概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍，如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些的診斷等湖南哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒取材必須新鮮，這一點對于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面：PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng)，染色時間10～20min（染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度，SO濃度高，染色時間適當(dāng)縮短；環(huán)境溫度高，染色時間也應(yīng)適當(dāng)縮短，反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時間）。染色過程中不能接觸伊紅，以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時，較好作消化對照，即取兩張連續(xù)切片，其中一張脫蠟至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如經(jīng)消化處理的切片染色陰性，不經(jīng)消化處理的切片染色陽性，即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉（鉀）溶液配置后，不能保存，因此，必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蠟切片脫蠟至水。（2）0.5%過碘酸水溶液5分鐘?；?%過碘酸95%酒精溶液（過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用）。（3）蒸餾水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分鐘。（Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用）（5）流水沖洗10分鐘。（6）蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。（7）脫水、透明、封蓋。結(jié)果：糖原呈紅色，細(xì)胞核呈藍色。試劑配制：（1）0.5%過碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸（98.3ml比重1.16鹽酸，加入蒸餾水成1000ml）20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水，攪拌加熱沸騰，待冷卻至50℃過濾，加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處，兩天后溶液變桔黃色或草黃色，然后加入少量活性碳并震蕩、過濾，此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色，染色效果較差。切取材料時刀要銳利，避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷。

糖原染色――檢查項目的注意細(xì)節(jié)：其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異，一般分為5級，即0～4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟：(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min，蒸餾水沖洗數(shù)次，待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min，蒸餾水沖洗數(shù)次，待完全干燥。(3)放入雪夫液30min，用自來水沖洗約5min，再用蒸餾水沖洗，然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min，水洗，晾干。糖原染色――檢查項目結(jié)果解讀：(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min，蒸餾水沖洗數(shù)次，待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min，蒸餾水沖洗數(shù)次，待完全干燥。(3)放入雪夫液30min，用自來水沖洗約5min，再用蒸餾水沖洗，然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min，水洗，晾干。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。安徽口碑好的糖原染色試劑盒哪里買

故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。提供糖原染色試劑盒哪里買

染色的一般原則：1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑，取用前請離心集液，以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后，分裝為小份避光保存于-20℃，即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測單細(xì)胞懸液，如使用組織樣本，首先必須制備成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不當(dāng)，可能引起假陽性，而用細(xì)胞刮子會造成細(xì)胞粘連成團，而影響檢測?？蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止進一步的損傷。提供糖原染色試劑盒哪里買