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1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用的基礎合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。使用說明稱取本品21.5g于1L蒸餾水或去離子水中加熱煮沸至完全溶解分裝115℃高壓滅菌30分鐘冷卻備用.慶大霉素瓊脂基礎
培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié)pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質,易被污染或變質。配好后不宜久置,現(xiàn)配現(xiàn)用。慶大霉素瓊脂基礎細菌L型分離瓊脂 L型細菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基 幽門螺桿菌液體培養(yǎng)基基礎 ATYP培養(yǎng)基 ATYP瓊脂。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養(yǎng)物質組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價格相當于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養(yǎng)基,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),如培養(yǎng)亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學結構的營養(yǎng)物質,其中的個別或少數(shù)成分為未明化學成分的必須營養(yǎng)物,成為半合成培養(yǎng)基,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。
長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產(chǎn)生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調整。酵母浸粉葡萄糖肉湯 肉浸液瓊脂 芽孢桿菌培養(yǎng)基 嗜熱脂肪桿菌恢復肉湯 硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,磷酸氫二鉀0.05g,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,硫酸亞鐵0.001g,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用。AB培養(yǎng)基基礎 地桿菌培養(yǎng)基基礎 硫還原泥土桿菌培養(yǎng)基基礎 固氮菌瓊脂(甘露醇) 固氮菌肉湯(甘露醇,葡萄糖)。疊氮化物葡萄糖液態(tài)培養(yǎng)基
林格氏液 PW(蛋白胨水) 比較大復壯稀釋液 pH7.8磷酸鹽緩沖液 磷酸鹽緩沖液(PBS)。慶大霉素瓊脂基礎
營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質,如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等,可供營養(yǎng)要求較高的細菌在其中生長。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長;結核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。比較常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基,用于細菌的增菌培養(yǎng),可泛用,也可專門用的,在專門用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質或生長因子。慶大霉素瓊脂基礎
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