M綠色酵母菌和霉菌肉湯

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-30

培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。某些培養(yǎng)基會(huì)在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化,例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。M綠色酵母菌和霉菌肉湯

培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基血清種類:目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因:來源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過長時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較少。40%尿素溶液培養(yǎng)基制備的質(zhì)量和配方對于細(xì)胞和微生物的生長、分化和培養(yǎng)效果具有至關(guān)重要的作用。

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按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:鑒別培養(yǎng)基,一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如,伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基(EMB)。培養(yǎng)基的分類有哪些?培養(yǎng)基按功能用途可分為幾種?培養(yǎng)基的分類有哪些?培養(yǎng)基按功能用途可分為幾種?常見的培養(yǎng)基有細(xì)菌培養(yǎng)基、牛心培養(yǎng)基、根瘤菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、面粉瓊脂培養(yǎng)基、微藻培養(yǎng)基、豆芽汁培養(yǎng)基、食用菌菌種培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基等等。

氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動(dòng)物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。無機(jī)培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細(xì)菌到研究微生物生理生化特性都普遍應(yīng)用。

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培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,現(xiàn)配現(xiàn)用。培養(yǎng)基種類繁多,根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對于成功的微生物培養(yǎng)至關(guān)重要。腸球菌肉湯

特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。M綠色酵母菌和霉菌肉湯

天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。M綠色酵母菌和霉菌肉湯

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