脲(尿素)培養(yǎng)基基礎

來源: 發(fā)布時間:2023-03-30

合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價格相當于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養(yǎng)基,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),如培養(yǎng)亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學結構的營養(yǎng)物質(zhì),其中的個別或少數(shù)成分為未明化學成分的必須營養(yǎng)物,成為半合成培養(yǎng)基,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。牛肉精蛋白胨培養(yǎng)基是常用的富營養(yǎng)培養(yǎng)基,適用于快速生長的微生物。脲(尿素)培養(yǎng)基基礎

培養(yǎng)基

氨基酸是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。42℃生長試驗用培養(yǎng)基人工合成基因可以在特定的培養(yǎng)基中得到表達,需要選擇含有適當營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。

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什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基分類有哪些?營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(yǎng)(氨基酸,維生素,核酸等)的能力,只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子才能生長,稱為營養(yǎng)缺陷型(auxotroph)。營養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株,它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列,如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變,由該基因所控制的酶合成受阻,該菌株也因此不能合成某種營養(yǎng)因子,使正常代謝失去平衡。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。

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培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應不同來鑒別細菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標本中的雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。常見的培養(yǎng)基包括LB培養(yǎng)基、TSB培養(yǎng)基等。改良COMBO培養(yǎng)基添加劑E(CR1土壤溶液)

常用的培養(yǎng)基中添加的基本營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、磷酸鹽、有機物、無機鹽和微量元素。脲(尿素)培養(yǎng)基基礎

培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。脲(尿素)培養(yǎng)基基礎

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