溴甲酚紫瓊脂(BPA)

來源: 發(fā)布時間:2023-05-06

培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。培養(yǎng)基還可以根據(jù)所需生長的微生物類別,加入特定的營養(yǎng)物質(zhì),例如血清、血紅蛋白等等。溴甲酚紫瓊脂(BPA)

培養(yǎng)基

以MS培養(yǎng)基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。改良McBride瓊脂基礎(MMA)黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。

溴甲酚紫瓊脂(BPA),培養(yǎng)基

氨基酸是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

細菌培養(yǎng)基之根瘤菌培養(yǎng)基:葡萄糖10g,磷酸氫二鉀0.5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.2g,酵母粉0.4瓊脂20g,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基:(1)淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉2.0g,硝酸鉀0.1g,磷酸氫二鉀0.05g,氯化鈉0.05g,硫酸鎂0.05g,硫酸亞鐵0.001g,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調(diào)成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調(diào)整pH值到7.2-7.4,分裝后滅菌,備用。無機培養(yǎng)基則為化學合成培養(yǎng)基,其用途從分離細菌到研究微生物生理生化特性都普遍應用。

溴甲酚紫瓊脂(BPA),培養(yǎng)基

bFGF是一個肝素結合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對滋養(yǎng)細胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細胞膜上FGF受體結合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關的基因表達。Thomson 等認為,像其他體外培養(yǎng)的人體細胞一樣,hES 細胞要求 bFGF 的存在以促進增殖。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),由53個氨基組成的活細胞,藉由刺激表皮細胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,達到修補增生肌膚表層細胞,據(jù)說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點是能夠促進細胞的增殖分化。所以加入它們都是促進細胞增殖的。孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。GC瓊脂基礎

制備培養(yǎng)基需要考慮生長細胞所需的營養(yǎng)、酸堿度和水分含量等因素。溴甲酚紫瓊脂(BPA)

天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時重復性強,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。溴甲酚紫瓊脂(BPA)

上海瑞楚生物科技有限公司在培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶一直在同行業(yè)中處于較強地位,無論是產(chǎn)品還是服務,其高水平的能力始終貫穿于其中。瑞楚生物是我國化工技術的研究和標準制定的重要參與者和貢獻者。瑞楚生物致力于構建化工自主創(chuàng)新的競爭力,多年來,已經(jīng)為我國化工行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟等的發(fā)展做出了重要貢獻。