BG11瓊脂培養(yǎng)基

來源: 發(fā)布時間:2023-05-06

氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。培養(yǎng)基可以分為有機培養(yǎng)基和無機培養(yǎng)基兩類。BG11瓊脂培養(yǎng)基

培養(yǎng)基

選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.02%,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%巰基乙酸鹽培養(yǎng)基 (巰基乙酸鹽肉湯)特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。

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培養(yǎng)基的分類有幾種呢?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)區(qū)分:1.液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基,又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。

在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過程中能用到。為了避免細(xì)胞爆破釋放DNA和蛋白質(zhì),培養(yǎng)基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類。

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培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術(shù),避免細(xì)菌交叉污染。溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基

無機培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細(xì)菌到研究微生物生理生化特性都普遍應(yīng)用。BG11瓊脂培養(yǎng)基

L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給,也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,可有效提高細(xì)胞活力。BG11瓊脂培養(yǎng)基

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