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改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿通常用于細(xì)菌的培養(yǎng)和分離,而不是直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。然而,通過(guò)一些調(diào)整和添加特定的成分,它也可以用于某些類型的細(xì)胞培養(yǎng)。以下是改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿用于培養(yǎng)和分離細(xì)胞的一些方法:選擇合適的基礎(chǔ)培養(yǎng)基:改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿的基礎(chǔ)瓊脂可以作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),但需要添加適合特定細(xì)胞類型的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子。添加細(xì)胞生長(zhǎng)所需的成分:為了滿足細(xì)胞生長(zhǎng)的需要,需要在瓊脂中添加血清、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和必要的緩沖系統(tǒng)。調(diào)整瓊脂濃度:根據(jù)細(xì)胞的粘附特性,可能需要調(diào)整瓊脂的濃度,以便細(xì)胞能夠在瓊脂上生長(zhǎng)和擴(kuò)散。選擇性添加抗生物質(zhì):如果需要防止細(xì)菌污染,可以在培養(yǎng)基中添加適量的抗生物質(zhì)。改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿的主要成分包括番茄粉、牛肉粉、酵母粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、乙酸鈉、乳糖和瓊脂。厭氧肉肝湯培養(yǎng)基
MD培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium)是一種常用于畢赤酵母(Pichiapastoris)等微生物的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**配方成分**:-MD培養(yǎng)基的主要成分包括酵母氮源、無(wú)氨基酸和硫酸銨、硫酸銨、D-葡萄糖和瓊脂糖H,還含有G418硫酸鹽用于抗生物質(zhì)的篩選。-具體成分如YNB(酵母氮源基)、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-組氨酸等。YNB的具體成分可以參見(jiàn)相關(guān)產(chǎn)品說(shuō)明。2.**用途**:-MD培養(yǎng)基主要用于畢赤酵母營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的轉(zhuǎn)化子篩選,特別是用于篩選his4標(biāo)記和ade2標(biāo)記。適用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Adenine)即含有腺嘌呤的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)腺嘌呤缺陷型畢赤巴斯德酵母,如PichiaPink菌株。-MDH培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Histidine)即含組氨酸的基礎(chǔ)葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)組氨酸缺陷型畢赤巴斯德酵母。3.**使用方法**:-如用于配置液體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入500mL水中,磁力攪拌溶解后,過(guò)濾除菌即可。-如用于配置固體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入250mL水中,磁力攪拌溶解后,過(guò)濾除菌70℃?zhèn)溆茫慌渲?50mL的4%的瓊脂粉,高壓滅菌70℃水浴備用;按照1:1混合后倒平板即可。牛津瓊脂添加劑亞硫酸鉍指示劑能夠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和大腸菌群,但不影響沙門氏菌的生長(zhǎng)。
改良察氏肉湯(ModifiedCzapekDoxBroth)是一種常用于培養(yǎng)霉菌的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**成分特點(diǎn)**:改良察氏肉湯的主要組成成分包括蔗糖作為的碳源,硝酸鈉作為的氮源,以及磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鉀、硫酸鎂、硫酸亞鐵等,這些成分提供必需的離子和緩沖作用。2.**pH值**:改良察氏肉湯的pH值通??刂圃?.0-6.5之間,這為霉菌提供了適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:這種培養(yǎng)基主要用于霉菌的增菌培養(yǎng),適用于多種菌的培養(yǎng)和傳代,包括曲霉、青霉和放線菌等。4.**制備方法**:改良察氏肉湯的制備方法包括稱量特定量的粉末,加入蒸餾水溶解,經(jīng)過(guò)高溫滅菌,并在冷卻后使用。5.**培養(yǎng)條件**:接種后,通常在23℃-28℃下進(jìn)行需氧培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間為48至72小時(shí),以觀察微生物的生長(zhǎng)情況。6.**質(zhì)控結(jié)果**:改良察氏肉湯支持多種質(zhì)控菌株的生長(zhǎng),例如黑曲霉ATCC16404和白色念珠菌ATCC10231,這些菌株在培養(yǎng)基中表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)。7.**應(yīng)用范圍**:除了霉菌培養(yǎng),改良察氏肉湯還可用于土壤微生物學(xué)檢驗(yàn)、和霉菌的抗性檢驗(yàn)等生物學(xué)方法。
除了Pachlewski固體培養(yǎng)基,適合用于厭氧微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基還包括以下幾種:1.**皰肉培養(yǎng)基**:這種培養(yǎng)基本身就是一個(gè)不需特殊設(shè)備的厭氧培養(yǎng)法,適合梭狀芽孢桿菌等厭氧菌的培養(yǎng)。2.**硫基乙酸鈉培養(yǎng)基**:通常用于培養(yǎng)厭氧菌,通過(guò)加入還原劑來(lái)創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境。3.**牛心腦浸液培養(yǎng)基**:這是一種常用的培養(yǎng)基,可以通過(guò)物理或化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢(shì),從而適合厭氧菌的培養(yǎng)。4.**Hungate厭氧管**:這是一種特殊的厭氧培養(yǎng)技術(shù),使用Hungate厭氧管可以為厭氧微生物提供一個(gè)無(wú)氧的生長(zhǎng)環(huán)境。培養(yǎng)基的制備需要在厭氧條件下進(jìn)行,并且要使用厭氧培養(yǎng)箱和厭氧技術(shù)進(jìn)行接種和培養(yǎng)。5.**厭氧袋(Bio-bag)**:這是一種在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來(lái)培養(yǎng)厭氧菌的方法。塑料袋內(nèi)裝有氣體發(fā)生管、美蘭指示劑管、鈀催化劑管和干燥劑,通過(guò)一系列操作在袋內(nèi)形成無(wú)氧環(huán)境,然后進(jìn)行培養(yǎng)。6.**厭氧手套箱(Anaerobicglovebox)**:這是一種大型的密閉金屬箱,箱內(nèi)通過(guò)控制氣體成分(H2,CO2,N2)達(dá)到厭氧狀態(tài),適合進(jìn)行厭氧菌的大量培養(yǎng)和研究。TBA培養(yǎng)基中添加的膽汁鹽是其選擇性培養(yǎng)特性的關(guān)鍵因素。膽汁鹽對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌具有抑制作用。
YEB預(yù)裝培養(yǎng)基培養(yǎng)皿是一種專門用于農(nóng)桿菌活化和單菌落擴(kuò)增的培養(yǎng)工具,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-YEB培養(yǎng)基的主要成分包括牛肉浸膏、酵母浸膏、蛋白胨、蔗糖和硫酸鎂。具體配方為每升含有牛肉浸膏5克,酵母浸膏1克,蛋白胨5克,蔗糖5克,硫酸鎂0.5克,pH值調(diào)至7.0。2.**培養(yǎng)用途**:-YEB培養(yǎng)基主要用于農(nóng)桿菌活化后單菌落擴(kuò)增的培養(yǎng)。它為農(nóng)桿菌提供了適宜的生長(zhǎng)環(huán)境,有利于其生長(zhǎng)和繁殖。3.**預(yù)裝便捷**:-YEB預(yù)裝培養(yǎng)基培養(yǎng)皿已經(jīng)將培養(yǎng)基和瓊脂混合并滅菌,用戶只需將培養(yǎng)皿打開(kāi),接種微生物后即可進(jìn)行培養(yǎng),無(wú)需額外準(zhǔn)備培養(yǎng)基,操作簡(jiǎn)便快捷。4.**無(wú)菌保證**:-預(yù)裝培養(yǎng)皿在生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的無(wú)菌操作和滅菌處理,確保培養(yǎng)皿內(nèi)無(wú)雜菌污染,為微生物的純種培養(yǎng)提供保障。5.**保存方便**:-YEB液體培養(yǎng)基為無(wú)菌溶液,主要由酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、硫酸鎂等組成,經(jīng)高壓滅菌。保存于4℃,有效期為6個(gè)月。6.**應(yīng)用廣**:-YEB培養(yǎng)基不僅用于農(nóng)桿菌的活化和擴(kuò)增,還可以與其他抗生物質(zhì)如利福平、卡那霉素等聯(lián)合使用,增強(qiáng)其選擇性。改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿需要存放在避光、干燥的地方,開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋以避免吸潮結(jié)塊。EMJH培養(yǎng)基基礎(chǔ)
亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿主要用于沙門氏菌,特別是傷寒沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng) 。厭氧肉肝湯培養(yǎng)基
支原體肉湯培養(yǎng)基是一種專門用于支原體的分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-支原體肉湯培養(yǎng)基的主要成分包括豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。具體配方為每升含有豬胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化鈉2.5g,葡萄糖5.0g,酚紅0.02g,pH值調(diào)至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原體的分離培養(yǎng),特別是肺炎支原體。支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》中體現(xiàn),要求使用支原體肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)監(jiān)測(cè)肺炎支原體。3.**培養(yǎng)條件**:-支原體肉湯培養(yǎng)基需要在36℃培養(yǎng)7-14天,觀察培養(yǎng)基變色結(jié)果。肺炎支原體可以發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖,使培養(yǎng)基的pH值降低,遇指示劑酚紅使培養(yǎng)基變黃。4.**添加劑**:-每瓶支原體肉湯培養(yǎng)基需配套青霉素溶液(80萬(wàn)IU),每1000ml支原體肉湯培養(yǎng)基溶液中添加1支青霉素溶液(80萬(wàn)IU),以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。5.**培養(yǎng)基靈敏度**:-支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基的靈敏度均達(dá)到10^9CCU·mL^-1。支原體肉湯基礎(chǔ)和精氨酸支原體肉湯基礎(chǔ)存放于2~8℃有效期為90天。厭氧肉肝湯培養(yǎng)基