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4.**培養(yǎng)條件**:-培養(yǎng)基的制備方法包括稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無(wú)菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng),使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時(shí),把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑,混勻,傾入無(wú)菌平皿。5.**質(zhì)量控制**:-質(zhì)控菌株在37℃培養(yǎng)24-48小時(shí),單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成藍(lán)色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不良。6.**儲(chǔ)存條件**:-制備好的固體平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃。7.**注意事項(xiàng)**:-嚴(yán)格按照標(biāo)簽說(shuō)明進(jìn)行配制培養(yǎng)基,避免混合時(shí)培養(yǎng)基和添加劑溫度過(guò)高導(dǎo)致平板出現(xiàn)絮狀物。干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。這些特點(diǎn)使得李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。YEB培養(yǎng)基由于能夠提供適宜的環(huán)境促進(jìn)農(nóng)桿菌的生長(zhǎng),在分子生物學(xué)和遺傳工程中是一種常用的培養(yǎng)基 。溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
改良高氏二號(hào)培養(yǎng)基(Gauze’sFluidMediumNo.2,Modified)是一種常用于放線菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分**:-葡萄糖:1.0g-蛋白胨:0.5g-胰蛋白胨:0.3g-氯化鈉:0.5g-復(fù)合維生素:2.75mg(包括VB1、VB2、VB3、VB5、VB6各0.5mg,VB70.25mg)-瓊脂:20.0g(用于固體培養(yǎng)基)-蒸餾水:1000mL-pH值:7.2-7.42.**用途**:-主要用于放線菌的分離和培養(yǎng),特別適用于高溫放線菌的篩選和培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末2.3g,溶解于1L蒸餾水或去離子水中,微溫溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。本品易結(jié)塊,但不影響使用。4.**滅菌方法**:-121℃高壓滅菌20分鐘。5.**pH調(diào)節(jié)**:-pH值控制在7.2±0.2(25℃),使用前需調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。6.**應(yīng)用實(shí)例**:-在醬香型大曲中高溫放線菌的篩選及風(fēng)味成分分析中,改良高氏二號(hào)培養(yǎng)基被用作分離篩選培養(yǎng)基,成功分離出高溫放線菌株。7.**儲(chǔ)存條件**:-常溫保存,避光防潮密閉干燥。8.**注意事項(xiàng)**:-培養(yǎng)基在使用前需充分溶解并調(diào)節(jié)pH值,確保培養(yǎng)條件適宜。-培養(yǎng)基易結(jié)塊,但不影響使用效果。這些特點(diǎn)使得改良高氏二號(hào)培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中具有重要價(jià)值。尿酸瓊脂改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿需要存放在避光、干燥的地方,開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋以避免吸潮結(jié)塊。
甘露醇氯化鈉瓊脂(MannitolSaltAgar,簡(jiǎn)稱MSA)是一種用于分離和鑒定革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌特別是金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的選擇性培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的主要成分包括甘露醇、氯化鈉、瓊脂、酚紅指示劑等。具體配方為每升培養(yǎng)基含有甘露醇10克、氯化鈉75克、瓊脂15克、酚紅0.03克,pH值通常調(diào)至7.2-7.4。2.**高鹽濃度**:-該培養(yǎng)基含有較高濃度的氯化鈉(7.5-10%),這種高鹽環(huán)境有助于抑制革蘭氏陰性細(xì)菌和一些其他非耐鹽細(xì)菌的生長(zhǎng),同時(shí)促進(jìn)耐鹽的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌如金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。3.**pH值**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的pH值通常在7.2-7.4之間,適合多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)。4.**指示劑**:-培養(yǎng)基中添加的酚紅指示劑可以顯示細(xì)菌的代謝活動(dòng),幫助鑒別細(xì)菌。例如,某些細(xì)菌在發(fā)酵甘露醇時(shí)會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化。5.**選擇性**:-甘露醇氯化鈉瓊脂具有選擇性,特別適合于金黃色葡萄球菌的分離和鑒定。金黃色葡萄球菌能夠在高鹽環(huán)境中生長(zhǎng),并利用甘露醇作為碳源,發(fā)酵產(chǎn)生酸,使培養(yǎng)基顏色變化。
除了Pachlewski固體培養(yǎng)基,常用的微生物培養(yǎng)基有多種,根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn),可以列舉如下:1.**按成分分類**:-**天然培養(yǎng)基**:含有化學(xué)成分不完全明了的天然物質(zhì),如蛋白胨、牛肉膏等。-**合成培養(yǎng)基**:由已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成,適用于科學(xué)研究。2.**按形態(tài)分類**:-**液體培養(yǎng)基**:不加任何凝固劑,適用于微生物的生理、代謝研究。-**半固體培養(yǎng)基**:加入少量凝固劑,用于觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)等。-**固體培養(yǎng)基**:加入足量的凝固劑,常用于微生物的分離、純化。3.**按用途分類**:-**基礎(chǔ)培養(yǎng)基**:提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基。-**營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基**:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、血液等。-**增菌培養(yǎng)基**:為液體培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng)。-**選擇性培養(yǎng)基**:含有抑菌劑,有利于特定微生物的增殖或分離。-**鑒別培養(yǎng)基**:加入試劑或化學(xué)藥品,通過(guò)培養(yǎng)后的變化區(qū)別不同類型的微生物。溴甲酚紫乳糖瓊脂培養(yǎng)皿可以用于檢測(cè)和分離能夠發(fā)酵乳糖的微生物,如大腸桿菌等,在微生物領(lǐng)域有很大作用。
改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿通常用于細(xì)菌的培養(yǎng)和分離,而不是直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。然而,通過(guò)一些調(diào)整和添加特定的成分,它也可以用于某些類型的細(xì)胞培養(yǎng)。以下是改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿用于培養(yǎng)和分離細(xì)胞的一些方法:選擇合適的基礎(chǔ)培養(yǎng)基:改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿的基礎(chǔ)瓊脂可以作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),但需要添加適合特定細(xì)胞類型的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子。添加細(xì)胞生長(zhǎng)所需的成分:為了滿足細(xì)胞生長(zhǎng)的需要,需要在瓊脂中添加血清、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和必要的緩沖系統(tǒng)。調(diào)整瓊脂濃度:根據(jù)細(xì)胞的粘附特性,可能需要調(diào)整瓊脂的濃度,以便細(xì)胞能夠在瓊脂上生長(zhǎng)和擴(kuò)散。選擇性添加抗生物質(zhì):如果需要防止細(xì)菌污染,可以在培養(yǎng)基中添加適量的抗生物質(zhì)。TSAM培養(yǎng)皿常用于檢測(cè)食品、水、牛奶和乳制品中的微生物,特別是霉菌和酵母菌的總數(shù)測(cè)定。V-P培養(yǎng)基
TBA培養(yǎng)皿的使用方法通常有將待測(cè)樣本接種到培養(yǎng)皿中,然后在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間,觀察菌落的生長(zhǎng)。溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
在植物組織培養(yǎng)中,除了脯氨酸,還有多種氨基酸和化合物對(duì)植物生長(zhǎng)和發(fā)育具有重要作用:1.**氨基酸**:甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、半胱氨酸等,它們不僅提供有機(jī)氮源,還促進(jìn)植物生長(zhǎng)及不定芽、不定胚的分化。2.**維生素**:如鹽酸硫胺素(VB1)、鹽酸吡哆醇(VB6)、煙酸(VB3)、肌醇等,它們?cè)谥参锏拇x過(guò)程中起催化劑作用。3.**植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑**:包括生長(zhǎng)素(如IAA、IBA、NAA、2,4-D等)和細(xì)胞分裂素(如6-BA、KT、ZT、2-ip等),這些調(diào)節(jié)劑控制器官發(fā)育模式,如根和芽的形成。4.**碳源和能源**:蔗糖是常用的碳源,提供能量,同時(shí)在高壓滅菌過(guò)程中轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟呛凸牵欣诩?xì)胞生長(zhǎng)和分化。5.**無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分**:大量元素(如氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫)和微量元素(如鐵、硼、錳、銅、鉬、鈷)對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要。6.**天然有機(jī)添加物**:如椰子汁、酵母提取物等,它們可能因品種、產(chǎn)地和成熟度而異,影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。7.**凝固劑**:瓊脂是常用的凝固劑,用于配制固體培養(yǎng)基,為植物細(xì)胞和組織提供穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境。8.**抗氧化劑**:如半胱氨酸、抗壞血酸等,用于防止酚類物質(zhì)引起的組織褐變。