南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-16

造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒,取頸正中切口剪開(kāi)皮膚,分離皮膚下軟組織并暴露頸動(dòng)脈鞘; 游離出頸總動(dòng)脈1.5cm,穿線備用; 向遠(yuǎn)心端找到頸外側(cè)動(dòng)脈,游離涌現(xiàn)結(jié)扎,提起頸總備用線,在近心端,遠(yuǎn)心端用動(dòng)脈夾夾住; 在近心端動(dòng)脈夾處,用5mL注射器針頭刺破血管,稍微提起動(dòng)脈夾,用鑷子夾住線栓,從小口插入動(dòng)脈后,去掉遠(yuǎn)心端動(dòng)脈夾,然后用鑷子夾住線栓,線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm; 用備用線將頸總和線栓一起結(jié)扎住,*好是結(jié)扎雙道,記錄線栓插入時(shí)間,在將動(dòng)脈夾另一邊近心端頸總結(jié)扎住,去掉動(dòng)脈夾; 注意縫合時(shí)不要將線栓帶出,*后根據(jù)評(píng)分來(lái)判斷成模性。 線栓法是國(guó)內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報(bào)道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型,此后 Longa等對(duì)該方法進(jìn)行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進(jìn)展,但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響,如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時(shí)間窗提供基礎(chǔ)依據(jù),對(duì)進(jìn)一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。腦梗MCAO模型是一種常用的腦梗動(dòng)物模型,用于研究腦梗死的發(fā)病機(jī)制和治*方法。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)

南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng),腦梗MCAO模型

實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)在科研領(lǐng)域中扮演著越來(lái)越重要的角色。他們通常由具有高度專(zhuān)業(yè)知識(shí)和豐富實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的科研人員組成,能夠?yàn)榭蒲腥藛T提供*方位的技術(shù)支持,幫助他們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中解決各種難題。 首先,實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)具備較高的學(xué)歷背景,通常擁有碩士或博士學(xué)位,甚至有些團(tuán)隊(duì)成員擁有海外留學(xué)或科研經(jīng)歷。他們通過(guò)系統(tǒng)的學(xué)習(xí)和實(shí)踐,掌握了先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法,能夠應(yīng)對(duì)各種復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)需求。 其次,實(shí)驗(yàn)外包團(tuán)隊(duì)具有豐富的實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)。他們經(jīng)過(guò)多年的實(shí)踐積累,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)有著深入的了解和掌握,能夠熟練應(yīng)對(duì)各種實(shí)驗(yàn)問(wèn)題。同時(shí),他們還具備嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度和科學(xué)的方法論,能夠確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)進(jìn)栓長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng),易造成蛛網(wǎng)膜下腔出血,死亡率較高、模型制備失敗。

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在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,動(dòng)物的表現(xiàn)會(huì)被詳細(xì)記錄。例如,它們是否能保持平衡,是否出現(xiàn)跌倒,以及跌倒的頻率和持續(xù)時(shí)間等。這些數(shù)據(jù)將被用于分析腦梗對(duì)動(dòng)物平衡和協(xié)調(diào)性的影響。 這種實(shí)驗(yàn)方法有助于我們深入理解腦梗對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響,以及可能對(duì)治*方法和康復(fù)策略的改進(jìn)提供重要信息。例如,如果發(fā)現(xiàn)腦梗后的動(dòng)物在轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)明顯下降,這可能表明腦梗影響了動(dòng)物的平衡和協(xié)調(diào)能力。這可能會(huì)引導(dǎo)研究人員尋找新的治*方法,以改善或恢復(fù)這些功能。

將小鼠進(jìn)行呼吸誘導(dǎo)麻醉(異氟烷)后,以仰臥位固定于操作臺(tái)上,繼續(xù)維持麻醉,常規(guī)消毒,備皮,取頸部正中切口,分離右側(cè)頸部總動(dòng)脈(CCA)、勁內(nèi)動(dòng)脈(ICA)和頸外動(dòng)脈(ECA),結(jié)扎ECA遠(yuǎn)心端,在ECA起始端留置結(jié)扎線,用動(dòng)脈夾將ICA遠(yuǎn)心端、CCA近心端夾閉。在ECA遠(yuǎn)心端結(jié)扎線外離斷,將ECA拉至與ICA成一條直線,于結(jié)扎線近端用顯微剪剪一斜口,將MACO栓線緩緩送入,栓線通過(guò)ECA近心端結(jié)扎線進(jìn)入ICA后,單道結(jié)扎ECA近心端結(jié)扎線,使栓線與血管相對(duì)固定,隨即松開(kāi)ICA上的動(dòng)脈夾,緩慢上提ECA近心端結(jié)扎線,將栓線緩慢送入,進(jìn)線至線栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓線插入40 min后拔出,隨后將ECA近心端結(jié)扎線結(jié)扎,松開(kāi)CCA近心端動(dòng)脈夾,碘伏消毒后逐層縫合切口。手術(shù)有一定技術(shù)難度,血管結(jié)扎不緊或結(jié)扎線脫落,會(huì)出血導(dǎo)致病理生理狀態(tài)改變或增加死亡。

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腦梗MCAO模型成功的評(píng)判方法主要包括以下幾個(gè)方面: 1.腦梗死面積的評(píng)估:通過(guò)TTC(2%,17分鐘)染色法對(duì)腦梗死面積進(jìn)行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對(duì)切片進(jìn)行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,通過(guò)比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評(píng)估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評(píng)分:參照Z(yǔ)ea-Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估。評(píng)分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。通過(guò)對(duì)不同處理組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分進(jìn)行比較,可以進(jìn)一步驗(yàn)證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過(guò)激光多普勒血流儀檢測(cè)相對(duì)腦血流動(dòng)脈減少情況,評(píng)估梗死血管的狹窄程度。同時(shí),觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。采用Longa等的5級(jí)4分法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行評(píng)價(jià)。上海定制腦梗MCAO模型課題研究

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在成功建立小鼠腦梗模型后,認(rèn)知功能的檢測(cè)可以通過(guò)以下方法進(jìn)行: 1. 迷宮測(cè)試:這是一個(gè)常用的方法,通過(guò)讓小鼠在迷宮中尋找食物,觀察其尋找食物的速度和正確性,來(lái)評(píng)估其認(rèn)知功能。 2. 物體識(shí)別測(cè)試:給小鼠展示兩個(gè)相似的物體,觀察其是否能夠正確識(shí)別并記住這兩個(gè)物體。 3. 社交互動(dòng)測(cè)試:觀察小鼠與其他小鼠的互動(dòng)情況,包括是否能夠正確識(shí)別其他小鼠,以及是否能夠進(jìn)行正常的社交行為。 這些測(cè)試可以幫助評(píng)估小鼠的認(rèn)知功能,從而了解腦梗對(duì)其認(rèn)知功能的影響。南京艾菱菲生物腦梗MCAO模型注意事項(xiàng)