西藏斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-31

Novelobjecttest:每條魚(yú)別離轉(zhuǎn)入透明實(shí)驗(yàn)池(25×20×15cm,長(zhǎng)×寬×高);每個(gè)容器包含一個(gè)新目標(biāo)(藍(lán)色塑料立方體,3×3×1cm,長(zhǎng)×寬×高),以確定其對(duì)新穎性的呼應(yīng)(圖3a)。溫?zé)崴?25±1°C,pH7.2-7.6,硬度44.0-61.0mgCaCO3/L)置于測(cè)試槽中使水深到達(dá)10厘米。經(jīng)過(guò)5分鐘的習(xí)慣期后,將新目標(biāo)放置在魚(yú)缸的一角,讓魚(yú)自在探究8分鐘。6分鐘記載他們的行為軌道。為了便于剖析,實(shí)驗(yàn)池實(shí)際上分為兩部分(新目標(biāo)區(qū)和無(wú)目標(biāo)區(qū))(圖3a)。咱們剖析了在虛擬切割的水槽兩部分所走過(guò)的總距離(cm)和所花費(fèi)的時(shí)刻(s)。 斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。西藏斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)方法

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而且通常斑馬魚(yú)產(chǎn)卵數(shù)量大,測(cè)試的樣本數(shù)很多,這樣一來(lái),可以確保統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上顯赫性與數(shù)據(jù)的可靠性。同時(shí),早期的安全評(píng)價(jià)還可以評(píng)估藥物對(duì)多種組織的傷害程度。因此,可用于測(cè)試潛在藥物對(duì)生物體的毒性評(píng)估。此外,科學(xué)家們還發(fā)現(xiàn),斑馬魚(yú)也是檢測(cè)水污染程度的優(yōu)良物種,因?yàn)檗D(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)可以根據(jù)污染物濃度的變化而發(fā)出可看到的熒光。隨著研究的深入,斑馬魚(yú)在人類科學(xué)史上的地位已不可撼動(dòng),這位實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的新星將和那些推動(dòng)人類進(jìn)步的科學(xué)家們一道永載史冊(cè)。山西斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)的可靠性。

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斑馬魚(yú)在國(guó)際上已廣泛應(yīng)用于食品藥品早期安全性評(píng)價(jià)和毒理學(xué)研究,輝瑞、默克、強(qiáng)生、阿斯利康等跨國(guó)醫(yī)藥巨頭都在用斑馬魚(yú)進(jìn)行藥物早期安全性評(píng)價(jià)。FDA和EMA早在2009年就通過(guò)了對(duì)斑馬魚(yú)安全藥理學(xué)數(shù)據(jù)的GLP檢查。中國(guó)重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng)自2012年開(kāi)始將斑馬魚(yú)藥物安全性評(píng)價(jià)技術(shù)列為了關(guān)鍵技術(shù)開(kāi)發(fā)課題之一,并連續(xù)滾動(dòng)支持。斑馬魚(yú)在化學(xué)品安全性評(píng)價(jià)與環(huán)境毒理學(xué)評(píng)價(jià)領(lǐng)域的應(yīng)用也已經(jīng)非常,OECD已經(jīng)頒布了9項(xiàng)相關(guān)的指導(dǎo)原則,中國(guó)也已制訂了10項(xiàng)相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。環(huán)特根據(jù)OECD指導(dǎo)原則和中國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),提供一系列的斑馬魚(yú)化學(xué)品安全性和環(huán)境毒理學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)。

斑馬魚(yú)在細(xì)胞譜系分析中的應(yīng)用斑馬魚(yú)是研究新的疾病治療方法的重要工具,因?yàn)榧膊∠嚓P(guān)基因的發(fā)現(xiàn)能夠鑒定基因特異***物靶標(biāo)。通過(guò)突變斑馬魚(yú)胚胎中的特定基因,可以在發(fā)育過(guò)程中分析突變體并用于鑒定疾病相關(guān)基因。然后可以將所得的觀察結(jié)果外推至人類基因組,以查看相同的突變基因是否是導(dǎo)致特定人類遺傳疾病的原因??偟膩?lái)說(shuō),斑馬魚(yú)作為動(dòng)物模型特別有用,因?yàn)樗鼈兊某杀镜?,繁殖時(shí)間短,并且與人類相對(duì)相似。所以研究中很受歡迎的動(dòng)物模型之一是斑馬魚(yú),一種原產(chǎn)于亞洲稻田的熱帶魚(yú)。斑馬魚(yú)用來(lái)做什么試驗(yàn)?

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社交對(duì)魚(yú)進(jìn)行交際測(cè)試所需的測(cè)試設(shè)備首要包括一個(gè)通明的Plexiglas十字槽(50×50×10cm,長(zhǎng)×寬×高)(圖3e)。水槽的每只臂都被一個(gè)Plexiglas墻隔開(kāi)。在水槽中,隨機(jī)挑選的一個(gè)末端腔室(其他三個(gè)腔室是空位)和中心腔室各包含一個(gè)相同處理的個(gè)體。轉(zhuǎn)移后,對(duì)魚(yú)進(jìn)行2分鐘的習(xí)慣,記錄其行為8分鐘。數(shù)據(jù)剖析中,計(jì)算出魚(yú)在其同伴(交際圈)鄰近區(qū)域的時(shí)刻,作為對(duì)同種視覺(jué)影響的呼應(yīng)。習(xí)慣漆黑或噪音影響:open-fieldtank被用來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)對(duì)漆黑或噪音影響的驚嚇?lè)磻?yīng)。漆黑和噪聲影響實(shí)驗(yàn)別離進(jìn)行。簡(jiǎn)略地說(shuō),連續(xù)的漆黑影響(5分鐘周期)通過(guò)放置在通明敞開(kāi)設(shè)備底部的多個(gè)主動(dòng)開(kāi)/關(guān)白色LEDs陣列來(lái)傳遞。此外,用一個(gè)塑料立方體(15×9×0.5cm,長(zhǎng)×寬×高)將其提升到100cm的高度,用手將其釋放到堅(jiān)固的平面上,發(fā)生一系列的噪聲影響(圖5a、b)。用了一個(gè)俯視圖照相機(jī)來(lái)捕捉魚(yú)的動(dòng)作。斑馬魚(yú)在化學(xué)品安全性點(diǎn)評(píng)與環(huán)境毒理學(xué)點(diǎn)評(píng)范疇的應(yīng)用也已經(jīng)十分廣。遼寧斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)

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斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)基因品系制備服務(wù)簡(jiǎn)介1.轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)基因技術(shù)包括顯微注射、電穿孔技術(shù)(電脈沖介導(dǎo))、精子載體法、GAL4/UAS轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)、Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)、擬型反轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)、重組桿狀病毒介導(dǎo)等方法。2.轉(zhuǎn)基因技術(shù)目的2.1通過(guò)定點(diǎn)敲除技術(shù)進(jìn)行基因鑒定和功能研究;2.2利用報(bào)告基因?qū)κ荏w等蛋白質(zhì)進(jìn)行功能研究;2.3構(gòu)建各種斑馬魚(yú)突變體,通過(guò)斑馬魚(yú)疾病模型進(jìn)行人類疾病研究和藥物篩選;2.4構(gòu)建含有特異性啟動(dòng)子的生物感應(yīng)器,用于環(huán)境監(jiān)測(cè)。3.Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)優(yōu)點(diǎn)3.1Tol2轉(zhuǎn)座子可攜帶大片段DNA;3.2Tol2轉(zhuǎn)座子沒(méi)有位置偏好性,幾乎能整合到染色體的任意位置;3.3Tol2轉(zhuǎn)座子的耐受范圍很廣;3.4Tol2作為天然的具有自主轉(zhuǎn)座活性的脊椎動(dòng)物轉(zhuǎn)座子,能夠在胚胎發(fā)育的不同時(shí)期進(jìn)行有效的轉(zhuǎn)移;3.5Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠有效克服外源基因在后代傳遞頻率低的技術(shù)難題。服務(wù)流程▲客戶提出轉(zhuǎn)基因品系制備需求→▲分析可行性→▲構(gòu)建載體→▲斑馬魚(yú)胚胎注射→▲founder篩選→▲F1代斑馬魚(yú)養(yǎng)殖→▲F2代斑馬魚(yú)養(yǎng)殖環(huán)特生物優(yōu)勢(shì)1.特有的養(yǎng)殖方法可縮短服務(wù)周期;2.豐富的經(jīng)驗(yàn)和及時(shí)溝通助力科研實(shí)驗(yàn)。西藏斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)方法

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