利用斑馬魚模型評價免疫毒性【評價原理】免疫毒性是指化合物對機(jī)體免疫系統(tǒng)的損傷作用,包括兩類,一是免疫抑制,即免疫系統(tǒng)的***抑制,可致機(jī)體對***的易感性增加及**發(fā)生率增高;另一是免疫增強,即免疫系統(tǒng)反應(yīng)性過度增強,可能包括免疫性產(chǎn)生,過敏反應(yīng)(超敏反應(yīng)或***反應(yīng))、自身免疫反應(yīng)以及不良免疫刺激等。斑馬魚具有先天免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng),與果蠅和線蟲模型相比,斑馬魚的免疫系統(tǒng)發(fā)育的更完整。研究證實斑馬魚與哺乳動物一樣,具有T細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞,其免疫系統(tǒng)對于環(huán)境中的免疫毒性物質(zhì)(包括哺乳動物)非常的敏感。免疫毒性指標(biāo)有3個:(1)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光斑馬魚,觀察中性粒細(xì)胞數(shù)量;(2)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因巨噬細(xì)胞綠色熒光斑馬魚,觀察巨噬細(xì)胞數(shù)量(熒光強度);(3)注射紅色熒光微球,巨噬細(xì)胞吞噬微球排出體外,用體內(nèi)微球的數(shù)量反映巨噬細(xì)胞吞噬功能。(4)檢測T/B相關(guān)基因(rag1和rag2)表達(dá)。有機(jī)物的毒性是如何從結(jié)構(gòu)組成上體現(xiàn)的?急性毒性試驗ld50測定實驗
睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變實驗——《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)第六章13睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變實驗體外哺乳動物細(xì)胞染色體畸變實驗——《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)第六章9體外哺乳動物細(xì)胞染色體畸變實驗體內(nèi)哺乳動物細(xì)胞微核實驗——《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)第六章12體內(nèi)哺乳動物細(xì)胞微核實驗體外哺乳動物細(xì)胞微核實驗——《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)第六章25體外哺乳動物細(xì)胞微核實驗(2021年第17號)急性吸入毒性實驗——香薰類化妝品急性吸入毒性實驗SN/T4030-2014慢性毒理實驗化學(xué)品毒理學(xué)測驗項目包含哪些內(nèi)容?
就拿小鼠局部淋巴結(jié)實驗(LLNA)舉例來說,它動物毒理實驗的原理是:過敏劑可誘導(dǎo)引起效果位點的引流淋巴結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞增殖,其增殖程度與過敏劑的劑量和致敏效能成正比,從而供應(yīng)了一種簡略的獲取定量丈量致敏性的辦法。動物毒理實驗實驗動物:成年未生育過且未受孕的雌性小鼠,一般是8周到12周,并且體重小于均勻體重的±20%。動物毒理實驗樣品狀態(tài):應(yīng)為液體、懸浮液、凝膠或膏狀物,此類樣品可應(yīng)用小鼠的耳部。動物毒理實驗實驗過程:LLNA實驗一般選用劑量反響方法,醫(yī)療器械供試樣品可能為浸提液。在對高毒性浸提液進(jìn)行檢驗的時候,比較推薦采納劑量反響方法和稀釋浸提液。
利用斑馬魚模型評價行為毒性【評價原理】行為是動物毒性應(yīng)激反應(yīng)重要而敏感的指標(biāo),神經(jīng)毒性往往會導(dǎo)致機(jī)體行為表現(xiàn)異常。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87%,神經(jīng)系統(tǒng)形成過程和發(fā)育機(jī)制與人類高度相似,且對于藥物的反應(yīng)也有著高度相似性。斑馬魚對藥物行為毒性的預(yù)測準(zhǔn)確性高,同時兼具快速、高效、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點。我們評價斑馬魚行為毒性有4個指標(biāo):1.行為學(xué);2.神經(jīng)凋亡細(xì)胞熒光信號強度;3.外周運動神經(jīng)長度;4.腦變性發(fā)生率。【實驗方案】我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照和服用/注射供試品組(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用/注射藥物一段時間后,我們觀察斑馬魚的運動行為,通過熒光染色觀察神經(jīng)凋亡細(xì)胞,也可以利用轉(zhuǎn)基因運動神經(jīng)綠色熒光NBT品系斑馬魚觀察外周運動神經(jīng)長度,同時可以觀察腦變性發(fā)生率。毒理檢測都包含哪些?
動物實驗和體外(代替)實驗主要有以下兩點不同之處:首先、實驗?zāi)繕?biāo)不同。動物實驗一般選用實驗動物(兔、豚鼠、小鼠)進(jìn)行實驗。代替實驗的主要實驗?zāi)繕?biāo)有重組人體安排模型(如3D皮膚模型)、離體安排(如牛眼)、細(xì)胞(人或動物的細(xì)胞系)和細(xì)菌(細(xì)菌回復(fù)突變實驗)。與此對應(yīng)的,不同實驗?zāi)繕?biāo)對不同實驗處理的敏感性不同。如可溶性受試物濃度較高時,滲透壓較高導(dǎo)致哺乳動物細(xì)胞損傷,細(xì)胞實驗不能正常進(jìn)行。而同一濃度進(jìn)行動物實驗,或許可以獲得實驗成果。同一樣品,選用不同的代替實驗,成果也或許不同。有些染發(fā)劑進(jìn)行兩項遺傳毒性實驗(細(xì)菌回復(fù)突變實驗和體外哺乳動物染色體畸變實驗)時,細(xì)菌回復(fù)突變實驗成果為陰性,另一項成果為陽性。那是由于他們的作用機(jī)制不同,但只需其中一個陽性,那便是存在安全危險。食物毒理學(xué)實驗項目有哪些?水質(zhì)急性毒性檢測多少錢
毒理學(xué)實驗點評需注意哪些問題?急性毒性試驗ld50測定實驗
新消毒劑增做的毒理實驗項目在我國首先出產(chǎn)和(或)銷售含有新的滅菌有效成分的新消毒劑,應(yīng)做以下毒理實驗:急性經(jīng)口毒性實驗(包括小鼠和大鼠);亞急性經(jīng)口毒性實驗;項致突變實驗(包括反映體細(xì)胞基因水平、體細(xì)胞染色體水平緩性細(xì)胞染色體水平三種類型實驗);亞慢性毒性實驗;致畸實驗。根據(jù)消毒劑的成分,或許有致敏作用的,增做皮膚反應(yīng)實驗。GB15193.1-2014食物安全國家標(biāo)準(zhǔn)食物安全性毒理學(xué)點評程序GB15193.2-2014食物安全國家標(biāo)準(zhǔn)食物毒理學(xué)實驗室操作規(guī)范急性毒性試驗ld50測定實驗
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