0.25%胰酶是細胞生物學中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。
胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。
胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么?(1)在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。(2)胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。福建重組胰酶進貨價
胰蛋白酶用法用量1.每次~5mg,用蒸餾水5~10ml溶解。2.一般應用:1次5000單位,每日1次肌注,用量酌情而定。為防止疼痛,可加適量普魯卡因。局部用*視情而定,可配成溶液制劑(~,微堿性時活性**強)、噴霧劑、粉劑、油膏等,用作體腔內(nèi)注射、患部注射、噴霧、濕敷、涂搽等。3.治蛇毒:取注射用結(jié)晶胰蛋白酶2000單位1~3支,加~(或注射用水)4~20ml稀釋,以牙痕為中心,在傷口周圍作浸潤注射,或在腫脹部位上方作環(huán)狀封閉1~2次。如病情需要可重復使用。若傷肢腫脹明顯,可于注射本品30分鐘后,切開傷口排毒減壓(嚴重出血者例外),也可在腫脹部位針刺排毒。如傷口已壞死、潰爛,可用其***胰蛋白酶注意事項1.不可作靜注。用前需作劃痕試驗,應注意可能產(chǎn)生過敏反應。2.吸取注射液后應另換針頭,以免注射時疼痛。3.外用時,可采用注射用制劑以緩沖液溶解,但必須在3小時內(nèi)用畢。胰蛋白酶不良反應:1.注射局部疼痛、硬結(jié)。2.本品可引起組胺釋放,產(chǎn)生全身反應,有寒戰(zhàn)、發(fā)熱、***、頭暈、胸痛、***、皮疹、血管神經(jīng)性水腫、呼吸困難、眼壓升高、白細胞減少等。癥狀輕時不影響繼續(xù)***,給予抗組胺*和對癥*物即可控制,嚴重時應即停*。3.本品偶可致過敏性休克。廣西胰酶市場報價如果消化液中含有胰酶和EDTA,好去除。
胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng),以及體外細胞培養(yǎng)過程中,均會使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細胞間蛋白質(zhì),使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑,溶液偏堿性時呈紫紅色,偏酸性時呈橘紅色,近中性時呈粉紅色。本產(chǎn)品為0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s緩沖液,不含EDTA,無酚紅指示劑,經(jīng)0.22μm過濾除菌。
胰酶消化細胞的原理首先,胰酶消化細胞的原理涉及到胰腺的分泌。當我們進食后,胃內(nèi)的食物會刺激胃黏膜釋放胃液,同時也會刺激胰腺分泌胰液。胰液中含有多種酶類物質(zhì),其中包括胰蛋白酶、胰脂酶和胰淀粉酶等。這些酶類物質(zhì)會通過胰管進入到小腸內(nèi),開始對食物進行消化作用。其次,胰酶消化細胞的原理涉及到酶與底物的結(jié)合。胰酶在小腸內(nèi)與食物中的蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物等成分結(jié)合,形成酶-底物復合物。胰蛋白酶主要作用于蛋白質(zhì),能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)分解為氨基酸;胰脂酶主要作用于脂肪,能夠?qū)⒅痉纸鉃楦视秃椭舅?;胰淀粉酶主要作用于碳水化合物,能夠?qū)⒌矸鄯纸鉃槠咸烟恰?**,胰酶消化細胞的原理涉及到產(chǎn)物的吸收。經(jīng)過胰酶的作用,食物中的大分子成分被分解為小分子,這些小分子能夠通過腸壁被吸收到血液循環(huán)中,為人體提供能量和營養(yǎng)物質(zhì)。胰酶的作用直接影響著人體對食物的消化和吸收,對維持人體的正常代謝和生理功能至關(guān)重要。綜上所述,胰酶消化細胞的原理是一個復雜而精密的過程,它涉及到胰腺的分泌、酶與底物的結(jié)合以及產(chǎn)物的吸收等環(huán)節(jié)。胰酶在人體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用,它對人體的健康和生命至關(guān)重要。因此,我們應該注重保護胰腺的健康,合理飲食。 適用于貼壁細胞的消化傳代;也可用于組織細胞分離的初步消化。
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37°℃時,胰酶溶液的作用能力**強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。實際消化后細胞狀態(tài)不會有太大差異,注意控制消化時間即可。廣西胰酶市場報價
有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑。福建重組胰酶進貨價
胰酶的作用原理是什么呢?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細胞膜上和培養(yǎng)皿結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時細胞在自身內(nèi)部細胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力的作用下成為球形。使用胰酶時需注意哪些細節(jié)問題?在使用胰酶(Trypsins)細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差,做流式時的CDMarker也可能會下降。胰酶進行分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時液體體積會膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并可能造成污染。胰酶適用于消化細胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對于纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。福建重組胰酶進貨價