CCK-8試劑(Cell Counting Kit-8 細(xì)胞計數(shù)試劑 [1] )中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan),生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。該方法已被廣fan用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗**藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗、細(xì)胞毒性試驗以及藥敏試驗等。對人類端粒長度定量qPCR檢測試劑盒旨在直接測量人類細(xì)胞群的平均端粒長度。北京人脂肪間充質(zhì)干試劑盒中喬新舟試劑盒
實驗注意事項:建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基頁面下加,容易產(chǎn)生氣泡,會干擾OD值讀數(shù)。白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,貼壁細(xì)胞的*小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。如果沒有450nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450nm濾光片的檢測靈敏度*高。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基,去掉藥物的影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。甘肅人脂肪間充質(zhì)干試劑盒試劑盒怎么樣我們的產(chǎn)品范圍較廣,涵蓋了大量分泌型循環(huán)蛋白,如細(xì)胞因子、趨化因子和生長因子,用于免疫學(xué)和炎癥研究。
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡便,使用安全,重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機溶劑和放射性同位素,步驟少,無損失,結(jié)果準(zhǔn)確!本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒jin一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進(jìn)行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟jin在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。1. MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有機溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。2. 與MTT方法相比,本方法線性范圍更寬,靈敏度更高。本方法對細(xì)胞無毒性,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)多次測定從而找到*佳測定時間。3. 本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定,實驗效果重復(fù)性好。4. MTT具有毒性,同時其生成的甲臜需要有機溶劑溶解,會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒,使用中無需有機溶劑,操作更加安全。5. 本試劑盒在4℃避光可長期保存,使用無需配制,即開即用。6. 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。這些檢測試劑盒旨在為血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品提供準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)定量。
熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中*有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。熒光素酶的具體應(yīng)用,主要有以下兩個方面:(一):pGL3-Basic---用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點與啟動子活性分析。把待分析啟動子區(qū)段構(gòu)建到F-Luciferase上游,和轉(zhuǎn)錄因子共轉(zhuǎn)染分析F-Luciferase活性即可反應(yīng)啟動子的活性高低。該質(zhì)粒通常需要結(jié)合持續(xù)性表達(dá)R-Luciferase的載體作為內(nèi)參以校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。(二):psiCHECK2---miRNA與其靶點相關(guān)分析,包括miRNA靶基因驗證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗證等。 需要把miRNA潛在結(jié)合靶點克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區(qū)域,然后與待測miRNA共同轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)測定R-Luciferase活性高低,F(xiàn)-Luciferase (hLuc+)作為校正內(nèi)參校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。使用ELISA讀數(shù)器對溶解的甲臜產(chǎn)物進(jìn)行分光光度計量化。湖南原代干試劑盒qpcr檢測試劑穹
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效期穩(wěn)定性 取已到效期的試劑盒按以上評價方法對試劑盒性能指標(biāo)進(jìn)行評價。 熱穩(wěn)定性試驗 生化試劑盒一般置2-8℃保存,為了快速有效地評價試劑盒的穩(wěn)定性,可以用加速試驗來估計。開瓶穩(wěn)定性 干粉試劑開瓶后(復(fù)溶后)在規(guī)定的儲存條件下保存至預(yù)期時間內(nèi),產(chǎn)品的性能至少應(yīng)符合線性和準(zhǔn)確度的要求。一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL,病人會增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。 北京人脂肪間充質(zhì)干試劑盒中喬新舟試劑盒
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實驗檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。