L15細(xì)胞培養(yǎng)基L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進(jìn)一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標(biāo)準(zhǔn)，有幾點(diǎn)建議可供參考：(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基?？梢圆殚唴⒖嘉墨I(xiàn)，或在購買細(xì)胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索，如Invitrogen網(wǎng)站上有一個CellLineDatabase的工具，選擇你感興趣的細(xì)胞類型，它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等，有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟，很方便。(2)其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基...

細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earl...

體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：1、氨基酸：是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺，它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源，同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖：培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解，六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原...

獲取細(xì)胞系可以通過原代細(xì)胞建立自己的培養(yǎng)系，或者也可選擇從商業(yè)供應(yīng)商或者非盈利性供應(yīng)單位(即細(xì)胞庫)處購買已經(jīng)建立的細(xì)胞系。聲譽(yù)良好的供應(yīng)單位可提供質(zhì)量的細(xì)胞系，而且會認(rèn)真地對細(xì)胞系進(jìn)行檢測，以確保其完好性，并且未被污染。我們不建議從其他實(shí)驗(yàn)室借用細(xì)胞，因?yàn)檫@會帶來很高的污染風(fēng)險。無論來源如何，使用細(xì)胞之前都應(yīng)確保所有新到細(xì)胞系已經(jīng)過支原體污染檢測。培養(yǎng)環(huán)境細(xì)胞培養(yǎng)的一大優(yōu)勢在于能夠控制細(xì)胞生長的物理化學(xué)環(huán)境(即：溫度、pH值、滲透壓、O2和CO2濃度)和生理環(huán)境(即：和營養(yǎng)素濃度)。除溫度外，培養(yǎng)環(huán)境均由生長培養(yǎng)基控制。上海中喬新舟簡述 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！浙江...

DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基，起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。例如CHO細(xì)胞表達(dá)...

細(xì)胞培養(yǎng)基的類型動物細(xì)胞的培養(yǎng)可以使用的培養(yǎng)基或人工/合成的培養(yǎng)基混合一些天然產(chǎn)物。天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基只由天然生成的生物液體組成。天然培養(yǎng)基非常有用和方便，適用于多種不同的動物細(xì)胞培養(yǎng)。但是，由于缺乏對這些天然培養(yǎng)基確切成分的認(rèn)識，使用天然培養(yǎng)基的主要缺點(diǎn)是可重復(fù)性差。人工培養(yǎng)基通過人為地加入一些營養(yǎng)物質(zhì)（有機(jī)的和無機(jī)的）、維生素、鹽、O2和CO2氣體、血清蛋白、碳水化合物、輔因子，制備成人工或合成的培養(yǎng)基[1]。不同的人工培養(yǎng)基被分別設(shè)計(jì)用于下面的某個用途：1）及時生存（平衡的鹽溶液，有特定的pH和滲透壓）2）長時間生存（平衡鹽溶液輔以各種配方的有機(jī)化合物和/或血清）3）不確定...

胸腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:胸腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類胸腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基是無菌的、液體培養(yǎng)基，包含必需和非必需氨基、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、、生長因子、微量礦物質(zhì)。該培養(yǎng)基不含血清。該培養(yǎng)基含HEPES和碳酸氫鹽緩沖體系，在5%二氧化碳/95%空氣培養(yǎng)箱中平衡時PH值為7.4。該培養(yǎng)基在數(shù)量上和質(zhì)量上都保證理想的營養(yǎng)平衡狀態(tài)，選擇性促進(jìn)體外正常人類氣道上皮細(xì)胞的生長。胸腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基包含500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，5ml氣道胸腺細(xì)胞生長添加物(TyEpiCGS,Cat.#3962)和5ml青霉素/鏈霉素溶液(P/S,Cat.#0503).上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的制作方法...

無污染體外生長的細(xì)胞對微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有抵抗能力，因此培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到無化學(xué)物質(zhì)污染、無微生物污染（如細(xì)菌、、支原體、病毒等）、無其他對細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染（如抗體、補(bǔ)體）。對于天然培養(yǎng)基，污染主要來源于取材過程及生物材料本身，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格選材，嚴(yán)格操作。對于合成培養(yǎng)基，污染主要來源于配制過程，配制所用的水，器皿應(yīng)十分潔凈，配制后應(yīng)嚴(yán)格過濾除菌?？蒲袑?shí)驗(yàn)中，細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好，就要用好血清，如Ausbian?特級胎牛血清，它適合各種細(xì)胞培養(yǎng)，尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞，如：干細(xì)胞、肝細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞，原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。Ausbian?特級...

體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：1、氨基酸：是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺，它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源，同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖：培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解，六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原...

合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基。早開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM），其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來。與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清，這樣才能維持細(xì)胞活力，促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對不同的動物細(xì)胞，現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、...

培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)一、基本概念通常，體外培養(yǎng)的生物成分無外乎兩種結(jié)構(gòu)形式：其一是小塊組織或稱為組織塊（tissueblock），一般稱為外植塊；其二是將生物組織分散后制成的單個細(xì)胞，一般稱為分離的細(xì)胞(isolatedcell)或者分散的細(xì)胞(dissociatedcell)。分散的過程通常在培養(yǎng)液或平衡鹽溶液中進(jìn)行，分散的細(xì)胞被懸浮于培養(yǎng)液或平衡鹽溶液中。單個細(xì)胞分散存在于培養(yǎng)液或其它平衡鹽溶液中、緩沖溶液中，就稱為細(xì)胞懸液(cellsuspension)。狹義的細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)主要是指分離（散）細(xì)胞培養(yǎng)，廣義的細(xì)胞培養(yǎng)的概念還包括單（個）細(xì)胞培養(yǎng)(singl...

肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：上皮細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類肺泡上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基，包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽，在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長，并為其達(dá)到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)。肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基包含500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，10mll胎牛血清（FBS,）、5ml上皮細(xì)胞生長因子（EpiCGS,）、5ml青霉素/鏈霉素溶液(P/S,)。 上海中喬新舟 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)勢。歡...

生長培養(yǎng)基可控制培養(yǎng)體系的pH值，為培養(yǎng)的細(xì)胞緩沖pH值的變化。這種緩沖作用通常是通過添加有機(jī)緩沖鹽(例如：HEPES)或者二氧化碳-碳酸氫鹽緩沖鹽實(shí)現(xiàn)。由于培養(yǎng)基的pH值取決于溶解態(tài)二氧化碳(CO2)與碳酸氫鹽(HCO–)間的精密平衡，因此空氣中二氧化碳含量的變化會改變培養(yǎng)基的pH值。為此，使用二氧化碳-碳酸氫鹽緩沖鹽培養(yǎng)基時必須使用外源性二氧化碳，特別是使用開放式培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞或者進(jìn)行高濃度的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系培養(yǎng)時。雖然大多數(shù)研究人員通常使用濃度5–7%的二氧化碳，但是4–10%濃度的二氧化碳適用于大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。然而，每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件不一，每種培養(yǎng)基均具有其推薦的二氧化碳壓力...

如何選用培養(yǎng)基?選擇培養(yǎng)基沒有一定標(biāo)準(zhǔn)，有幾點(diǎn)建議可供參考：1.建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基?？梢圆殚單墨I(xiàn)，或在購買細(xì)胞株時咨詢。2.根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選1640；進(jìn)行細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，可選擇IMDM。3.用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞，觀察其生長狀態(tài)，可以用生長曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基，這是客觀的方法，但比較繁瑣。（AmericanTypeCultureCollection）收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cellsandhybridomas鏈接，輸入細(xì)胞名稱就可以搜...

體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：1、氨基酸：是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺，它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源，同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖：培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解，六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原...

M199細(xì)胞培養(yǎng)基1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，即M-199。除BSS外，含有53種成分，為多方面培養(yǎng)基，主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?，F(xiàn)普遍用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)。McCoy5A培養(yǎng)基1959年MeCoy為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì)，BSS＋40種成分?？芍С侄喾N（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、HT-29、BHL...

在低血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中，為滿足細(xì)胞生長增殖需要，常常添加一些成份：蛋白質(zhì)、多肽、核苷、嘌呤、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、脂類、及一些血清替代因子等。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用，動物細(xì)胞對許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用，如白蛋白、傳遞蛋白、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸、、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白，能夠結(jié)合鐵，促進(jìn)細(xì)胞對鐵離子的吸收，并具有作用，其促生長作用可能與其具有生長因子的功能有關(guān)。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖和氨基酸的利用，商業(yè)化中一些生長因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中，主要用來刺激細(xì)胞增殖，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成。乙醇...