體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分、促生長(zhǎng)因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營(yíng)養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)條件一般包括以下幾個(gè)方面:1、氨基酸:是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖:培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收能力比較高,半乳糖比較低。體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),幾乎所有的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。3、維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。4、無機(jī)離子與微量元素:細(xì)胞生長(zhǎng)除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基如何選擇?上海中喬新舟告訴您。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!山西乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。 山西乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別上海中喬新舟 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基值得信賴。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基上皮細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長(zhǎng),并為其達(dá)到理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)。上皮細(xì)胞培養(yǎng)基包含500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,10mll胎牛血清(FBS,)、5ml上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EpiCGS,)、5ml青霉素/鏈霉素溶液(P/S,)。
細(xì)胞培養(yǎng)的比較好溫度主要取決于細(xì)胞供體的體溫,此外也受到解剖部位體溫差異的影響(例如:皮膚溫度低于骨骼肌的溫度)。與溫度過低相比,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)溫度過高是更為嚴(yán)重的問題;因此,往往將培養(yǎng)箱的溫度設(shè)定為略低于比較好溫度。大多數(shù)人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系在36℃至37℃下具有比較好生長(zhǎng)狀態(tài)。定期檢查培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)(即:形狀和外觀)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)取得成功至關(guān)重要。除確認(rèn)細(xì)胞健康狀態(tài)外,每次操作細(xì)胞時(shí)通過肉眼和顯微鏡檢查細(xì)胞還可早期發(fā)現(xiàn)污染征象,避免污染擴(kuò)散至實(shí)驗(yàn)室其他細(xì)胞。細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象只表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的應(yīng)用范圍十分廣闊。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長(zhǎng)因子及:針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長(zhǎng)因子。也是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基怎么選?上海中喬新舟告訴您。山西乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
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經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用普遍的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。其具體的特征及應(yīng)用如下:1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基(BasalMediumEagle),1955年Eagle設(shè)計(jì),BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡(jiǎn)單、便于添加,適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用,在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基又稱低限量Eagle培養(yǎng)基(MinimalEssentialMedium),1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細(xì)胞單層生長(zhǎng),有可高壓滅菌品種,是一種基本、試用范圍廣的培養(yǎng)基,但因其營(yíng)養(yǎng)成分所限,針對(duì)生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí),并不一定是使用效果比較好或者經(jīng)濟(jì)的培養(yǎng)基。 山西乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。