肝臟原位灌注法：（為分離肝細(xì)胞的經(jīng)典方法）1，在38度-39度的水浴槽中預(yù)熱hepes緩沖液和膠原酶液，使其在肝內(nèi)達(dá)到37度。2，給大鼠（180-200g）腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g，從古靜脈注射肝素1000u，打開(kāi)腹腔，在門靜脈的肝外5mm處松松的放一個(gè)結(jié)扎線環(huán)，將血管套管插入至肝掌，結(jié)扎，快速切開(kāi)肝下血管與面壓力過(guò)高，關(guān)注500ml無(wú)鈣hepes緩沖液，流速為30ml/min，數(shù)秒鐘肝臟即變白。3，灌注300ml膠原酶液，流速15ml/min，持續(xù)20min。肝臟腫大。4，切下肝臟。用hepes緩沖液沖洗。切開(kāi)肝纖維囊，收集消化清洗液被并混入100mlleibovitzL15培養(yǎng)液，該懸液含大量肝細(xì)胞。5，用兩層紗布或60-80um尼龍篩過(guò)濾細(xì)胞懸液，靜置，使活細(xì)胞沉降20分，室溫下，去除含組織碎屑和死細(xì)胞的上清液。6，低速離心法清洗細(xì)胞50g40s三次以去除膠原酶，破壞的細(xì)胞以及肺肝實(shí)質(zhì)來(lái)源的細(xì)胞。7，將細(xì)胞收集在培養(yǎng)液F12中（含，10ug/ml牛胰島素，），co2孵箱內(nèi)培養(yǎng)。8，傳代培養(yǎng)：細(xì)胞長(zhǎng)滿時(shí)，先用BSS洗1-2次，再用1：1的，吸除消化液，輕輕洗細(xì)胞層，加適量培養(yǎng)液，用吸管吹打成細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)。通常從一個(gè)大鼠肝中可獲得4*10‘6-6*10’6個(gè)活細(xì)胞。 上海中喬新舟 原代肝細(xì)胞安心售后。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！江西大鼠原代肝細(xì)胞種類
細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說(shuō)即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段，但實(shí)際上，通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。一般持續(xù)1-4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動(dòng)，可見(jiàn)細(xì)胞分裂，但不旺盛。原代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從組織分離出來(lái)，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段。同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。原代培養(yǎng)的過(guò)程指動(dòng)物的組織或從機(jī)體取出后，經(jīng)機(jī)械法或各種酶類（常用胰蛋白酶）和鰲合劑（常用EDTA）處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，加入適量培養(yǎng)基，置于合適的培養(yǎng)容器中，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定條件下，使之生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。 內(nèi)蒙古鴨 野鴨原代肝細(xì)胞種類原代肝細(xì)胞的價(jià)格分析。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！
注意事項(xiàng)1.取材要求新鮮，無(wú)菌，解剖小鼠時(shí)，注意不要損傷脾臟及其周圍的臟器，尤其是腸道等，防止污染脾臟。2.沖洗脾臟時(shí)要盡量洗凈血污，去除無(wú)用組織，并要防止組織干燥。3.碾磨后及時(shí)用清水沖洗篩網(wǎng)，防止組織、細(xì)胞阻塞網(wǎng)孔。4.計(jì)數(shù)前，注意吸盡平皿里的細(xì)胞，充分混勻，使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。5.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在操作臺(tái)無(wú)菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，勿在邊緣非無(wú)菌區(qū)域操作。6.金屬器械不能在火焰中燒的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，燒過(guò)的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織，以免造成組織損傷。7.另外膠塞過(guò)火焰時(shí)也不能時(shí)間長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞。8.吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管頭中營(yíng)養(yǎng)液能燒焦形成炭膜，再用時(shí)會(huì)把有害物帶入營(yíng)養(yǎng)液中。
藥物性肝損傷（DILI）是臨床常見(jiàn)的肝損傷類型，是嚴(yán)重的藥物不良反應(yīng)之一。細(xì)胞死亡是DILI的重要特征，藥物可通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和死亡受體等方式凋亡通路，誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡或壞死，誘發(fā)肝損傷。除凋亡和壞死外，DILI過(guò)程中還伴隨著自噬、焦亡和鐵死亡。自噬可以去除受損的蛋白質(zhì)以及細(xì)胞器，是肝細(xì)胞存活的重要機(jī)制，但也可能誘導(dǎo)肝細(xì)胞死亡。焦亡和鐵死亡是近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞死亡方式，其在DILI中的作用尚未完全闡明。阻斷肝細(xì)胞死亡通路，是DILI的重要手段。水飛薊素、柚皮素、人參皂苷等可以抑制肝細(xì)胞死亡通路，是DILI的潛在藥。針對(duì)不同細(xì)胞死亡方式的機(jī)制和特點(diǎn)，研究改善肝細(xì)胞死亡的藥物對(duì)DILI具有重要意義?？偨Y(jié)了DILI中肝細(xì)胞死亡的機(jī)制，并論述了潛在的藥物。 原代肝細(xì)胞的生產(chǎn)廠家。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！
小鼠原代肝細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察本實(shí)驗(yàn)在Seglen兩步灌流法的基礎(chǔ)上改進(jìn)，平均每只小鼠肝臟可獲得3×107～5×107個(gè)細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果顯示，即時(shí)分離的原代肝細(xì)胞活率可達(dá)到85%～90%。即時(shí)分離的原代肝細(xì)胞胞體呈圓形或類圓形，多為單核或雙核，細(xì)胞間邊界清晰(圖1A)。接種后的肝細(xì)胞4h開(kāi)始貼壁，24h大部分肝細(xì)胞貼壁，細(xì)胞形態(tài)多呈多角形或不規(guī)則形，細(xì)胞核大而圓，可見(jiàn)明顯的雙核或多核，細(xì)胞有向外延展趨勢(shì)，細(xì)胞間邊界不清(圖1B)。此外，按上述方法分離出的原代肝細(xì)胞在體外可存活1周左右，其中3～5d狀態(tài)比較好，第6天開(kāi)始細(xì)胞凋亡增加 原代肝細(xì)胞的定制尺寸。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！內(nèi)蒙古鴨 野鴨原代肝細(xì)胞種類
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肝臟，是脊椎動(dòng)物體內(nèi)以代謝功能為主的，也是人的五臟之一。肝臟能促使一些有毒物質(zhì)的改進(jìn)，再排泄體外，從而起到作用。它是人體內(nèi)的一座“化工廠”，是新陳代謝的重要。但同時(shí)，肝臟也十分脆弱，過(guò)度的酒精、藥物帶來(lái)的毒性也會(huì)對(duì)其造成不可逆的損傷。因此無(wú)論在疾病研究、藥物研發(fā)，或是環(huán)境安全等的研究中，對(duì)肝臟進(jìn)行研究都至關(guān)重要。在這些研究中使用原代肝細(xì)胞，往往是比較好的選擇。因?yàn)樵?xì)胞離體時(shí)間短，保持了其在體內(nèi)的生物學(xué)特性，更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型。同時(shí)也無(wú)須擔(dān)心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理問(wèn)題，亦可減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需要的的成本開(kāi)支，實(shí)現(xiàn)了減少（Reduction）、替代（Replacement）、優(yōu)化（Refinement）的3R倫理原則。 江西大鼠原代肝細(xì)胞種類
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1、原代細(xì)胞：ScienCell（中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理）人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系（株）：種類豐富（1000余種），已通過(guò)STR鑒定；提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品：支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù)：綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建，細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。