您想要快速、準確的了解不同處理、來源的組織或細胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達,少至0.1ng cDNA 就可快速準確的檢測和量化靶基因的表達。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達分析,這些引物組能特異性地識別和高效地擴增靶基因的cDNA。
可以應(yīng)用以下等領(lǐng)域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細胞之間的信號異常,
3、確定藥物作用機制,
4、預(yù)測各種疾病的藥物療效,
5、評估藥物對基因表達和信號傳導(dǎo)的影響。
這些檢測試劑盒旨在為細胞裂解液中的總特異性磷酸化修飾或切割位點蛋白質(zhì)提供準確、靈敏和快速蛋白質(zhì)定量。Isolation Kit
慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達。在感ran能力方面可有效地感ran神經(jīng)元細胞、肝細胞、心肌細胞、**細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,從而達到良好的的基因zhi liao效果,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被廣fan地應(yīng)用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效果差,轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑zhi作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。采用事先在體外構(gòu)建能夠表達siRNA的載體,然后轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄siRNA的策略,不但使脂質(zhì)體有效轉(zhuǎn)染的細胞種類增加,而且對基因表達抑zhi效果也不遜色于體外合成siRNA,在長期穩(wěn)定表達載體的細胞中,甚至可以發(fā)揮長期阻斷基因表達的作用。乳酸(LA)含量檢測試劑盒ScienCel已經(jīng)開發(fā)出多種的細胞檢測試劑盒,幫助您評估酶活性、代謝水平和細胞生長狀態(tài)以及干細胞研究等。
不過也有用單抗做檢測抗體的情況,尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢,但該法只適用于有多個結(jié)合位點的抗原檢測,主要用于檢測各種大分子抗原——例如在醫(yī)學(xué)檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的,以及在科研中檢測細胞因子等。
由于雙抗體夾心法特異性高,在檢測過程中有時會將樣本和酶標抗體同時加入進行反應(yīng),稱為雙抗體夾心一步法,因為操作時間短,在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢。
但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應(yīng)(hook ffect),因為此時如果樣本中抗原含量過高會導(dǎo)致其與固相抗體和酶標抗體均有結(jié)合而無法形成“夾心復(fù)合物”,此時測出的結(jié)果將低于實際含量甚至是陰性結(jié)果。
因此,如果使用雙抗體夾心一步法測定樣本中抗原含量時要注意測量的線性范圍,另外使用高親和力的單抗也可削弱鉤狀效應(yīng)。
ELISPOT法源自ELISA,又突破傳統(tǒng)ELISA法,是定量ELISA技術(shù)的延伸和新的發(fā)展。兩者都是檢測細胞產(chǎn)生的細胞因子或其他可溶性蛋白,它們*大的不同在于:ELISA通過顯色反應(yīng),在酶標儀上測定吸光度,與標準曲線比較得出定量的可溶性蛋白總量。ELISPOT通過顯色反應(yīng),在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應(yīng)位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點,可直接通過ELISPOT分析系統(tǒng)對斑點進行計數(shù),從而計算出分泌該蛋白或者細胞因子的細胞的頻率。由于是單細胞水平檢測,需細胞量少, 比ELISA更靈敏。捕獲抗體為高親和力、高特異性、低內(nèi)du素單抗,在研究者以刺激劑激huo細胞時,不會影響活化細胞分泌細胞因子。但該方法對于操作者的技術(shù)要求較高,要保證孔中細胞的均勻性,否則讀板誤差會很大。熒光素酶(luciferase)是指能催化不同底物發(fā)生氧化使其發(fā)射出熒光的一類酶的總稱。
1996年第yi次報道其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是一個包含有11個β折疊的“桶”形結(jié)構(gòu),發(fā)色團隱藏在結(jié)構(gòu)的中心,不被水溶劑猝滅。這種緊密排列的結(jié)構(gòu)對整個GFP蛋白是很重要的,它幾乎可以完全維持熒光活性;少量的斷裂是可以平衡的,少量的點突變也是可以接受的。與當(dāng)時的傳統(tǒng)熒光染料相比,GFP的主要優(yōu)勢在于它無毒,并且可以在活細胞中表達,從而能夠用于研究動態(tài)的生理過程。
幾乎就在它的序列被闡明的同時,科學(xué)家們就開始通過誘導(dǎo)突變來設(shè)計新的綠色熒光蛋白版本。1995年,RogerY.Tsien描述了一個S65T點突變,該突變增加了GFP的熒光強度和光穩(wěn)定性。這也使其主激發(fā)峰從395nm轉(zhuǎn)移到488nm,有效地改善了野生型蛋白的缺陷,促進了其在研究中的廣泛應(yīng)用。自那以后,許多其他的突變被引入到綠色熒光蛋白中,新的熒光團迭代不斷地被設(shè)計出來。 在用酶標儀檢測結(jié)果的時候,為了保證實驗結(jié)果的線性,MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。Colorimetric Nitric Oxide Assay
基于慢病毒載體的基因療法已成為zhi liao多種疾病的選擇。Isolation Kit
宿主細胞蛋白(hostcellprotein,HCP)是指生物制品中來自生產(chǎn)細胞系的宿主細胞的蛋白成分,既包括宿主細胞的結(jié)構(gòu)蛋白也包括宿主細胞(傳代細胞)分泌的促生長因子等。HCP具有潛在的安全風(fēng)險,作為生物制品中的非目標成分,HCP可能引發(fā)機體未知的免疫應(yīng)答而影響生物制品的功效,甚至引起超敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)。因此,建立合適的HCP檢測方法,有助于生物制品的質(zhì)量控制,提高生物制品的使用安全性。所有生物制劑的工藝開發(fā)的都必須經(jīng)過HCP檢測,并證明已在純化過程中將它們降低到安全水平,一般要求每mg藥物HCP應(yīng)當(dāng)控制在ng范圍內(nèi)。Isolation Kit
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。