ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)是一種快速檢測(cè)臨床和實(shí)驗(yàn)樣品中蛋白質(zhì)含量的方法,根據(jù)研究需求,有許多方式可供選擇,如直接ELISA,間接ELISA,競(jìng)爭(zhēng)性ELISA和夾心ELISA等。ELISA是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的一種技術(shù),其具有快速、易于操作等優(yōu)點(diǎn),但當(dāng)條件不合適時(shí),其往往不能給出*佳的結(jié)果,不能保持一致性和可復(fù)制性。
ELISA是Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay的簡(jiǎn)稱,即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,是研究蛋白抗體的重要方法。它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶進(jìn)行直接或間接結(jié)合,然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),進(jìn)行定性和定量分析。1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了該方法用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。
ELISA大致分為五種類型:直接法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法、夾心法、捕獲包被法。
這些蛋白質(zhì)對(duì)細(xì)胞發(fā)育、增殖、遷移、分化和成熟來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。Absolute Human Telomere Length Quantification qPCR Assay Kit
細(xì)胞凋亡晚期,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3'-OH形成,很少能夠被染色。TRA-1-81優(yōu)化堿性磷酸酶活性測(cè)定以檢測(cè)PSC中的堿性磷酸酶活性,并提供用于測(cè)量干細(xì)胞未分化/分化的定量測(cè)定。
在正常免疫應(yīng)答過(guò)程中,人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 可以驅(qū)使白細(xì)胞定向遷移到受傷或gan染部位以保護(hù)機(jī)體防御外來(lái)致病物,但是在特定的環(huán)境中,免疫細(xì)胞也會(huì)因過(guò)度活化而攻擊正常組織,導(dǎo)致自身免疫性疾病。人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 因此也和許多自身免疫性和過(guò)敏性等疾病相關(guān)聯(lián),包括多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈硬化、哮chuan和移植排斥等。
如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體(ENA),抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風(fēng)濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞抗體,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰瘡,蛋白酶,短膜蟲法,肝-腎,肝-腎-胃,肌內(nèi)膜抗體,角蛋白抗體,抗核抗體,抗核糖體蛋白抗體,抗聚角蛋白微絲蛋白抗體,抗鏈O,抗卵巢抗體,抗平滑肌抗體,抗線粒體抗體,抗心肌抗體,抗組蛋白抗體,粒細(xì)胞彈性蛋白酶,皮膚抗體,腎上腺抗體,腎小球基底膜,腎小球基底膜抗體,髓過(guò)氧化物酶,條紋肌抗體,網(wǎng)硬蛋白抗體,胃壁細(xì)胞抗體,胃蛋白酶,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,細(xì)菌性滲透性增強(qiáng)因子等。
Cell Counting Kit-8簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),適用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)原理:WST-8屬于MTT的升級(jí)產(chǎn)品,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物(formazan)。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長(zhǎng)處測(cè)定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
用途:CCK-8法應(yīng)用非常廣fan,如藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢測(cè)等。 CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng):1、酚紅和血清對(duì)CCK-8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾,可以通過(guò)減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,*外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測(cè)定孔用。4、金屬對(duì)CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會(huì)100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)胞周期是指連續(xù)分裂細(xì)胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過(guò)程。Isolation Kit
幾乎不受環(huán)境pH影響。Absolute Human Telomere Length Quantification qPCR Assay Kit
與正常細(xì)胞相比,ai細(xì)胞的代謝機(jī)制會(huì)發(fā)生變化,以滿足增殖的需求,使其成為判斷ai變的一個(gè)重要因素。ai細(xì)胞內(nèi)代謝的改變?cè)黾恿似浯蠓肿拥纳锖铣?,?chuàng)出了新的微環(huán)境以應(yīng)對(duì)活性氧 (ROS) 的增加。這種代謝改變背后的驅(qū)動(dòng)因素包括基因表達(dá)的改變以及代謝酶活性的改變。
代謝檢測(cè)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,為了簡(jiǎn)化繁瑣的操作,快速獲得數(shù)據(jù),各種檢測(cè)試劑盒應(yīng)運(yùn)而生。Abcam也提供各類代謝檢測(cè)試劑盒,科研用戶只需通過(guò)酶標(biāo)儀、顯微鏡或流式細(xì)胞儀,就可直接讀取活細(xì)胞、裂解液和生物流體樣本的數(shù)據(jù)即可。 Absolute Human Telomere Length Quantification qPCR Assay Kit
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。