細胞結構及功能的研究,是細胞生物學的基本課題,其重要的研究手段之一是分離純的亞細胞組分 。這種拆離的方法,使細胞中各種生物學過程彼此分開,互不干擾,便于確定一種復雜過程中的細節(jié),從而深化我們對細胞整體功能的認識。
常規(guī)分離提取方法往往一次jin能提取1-2種細胞組分,同時不僅對設備要求高,而且操作起來費時費力,*后的效果還不佳。作為生命科學領域知ming的解決方案供應商,艾美捷科技為您推薦市場上唯yi一款能夠一次性提取4種組分的試劑盒,能夠滿足絕大多數(shù)科研工作者的分離需求,不僅高效便捷,更確保蛋白以及組分的完整。 示蹤試劑盒中所使用的熒光探針具有極低細胞毒性和無生物活性的特點。小鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)試劑盒
隨著病毒生物學的發(fā)展,種類繁多的病毒載體已越來越成為向各種實驗系統(tǒng)(如細胞系、原代細胞、組織臟器等)轉運核酸的重要工具。除了在實驗室的組織培養(yǎng)和動物模型生產中發(fā)揮重要作用,它們還被用于zhi 療遺傳性疾病的臨床試驗中。目前主流的病毒載體系統(tǒng)主要包括慢病毒(LV)、(γ-)逆轉錄病毒(RV)、腺病毒(Ad)和腺相關病毒(AAV)。我們分述之。慢病毒和逆轉錄病毒均屬于逆轉錄病毒科。其典型特征為其RNA基因組能逆轉錄為cDNA副本,cDNA副本又能穩(wěn)定整合至宿主細胞基因組中(這就是常說的穩(wěn)轉)。逆轉錄病毒通常分兩種:簡單的(有時又稱為致ai病毒或γ-逆轉錄病毒,如鼠白血病病毒)和復雜的(如慢病毒)。這些亞型間主要的差異在于復雜的逆轉錄病毒存在一些附屬基因和調控基因,而簡單的則沒有(下文有進一步的討論)。這兩類病毒顆粒都含有兩份正鏈RNA,RNA上附有病毒反轉錄酶(RT),它們位于病毒的內核(圖1)。位于內核的還有結構蛋白和酶,包括核殼(NC)、衣殼(CA)、整合酶(IN)和蛋白酶(PR)。內核由一圈外周蛋白層包圍,外周蛋白包括基質蛋白(MA),基質蛋白又被來源于宿主細胞細胞膜插有包膜糖蛋白的腹膜所包圍。小鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)試劑盒優(yōu)化堿性磷酸酶活性測定以檢測PSC中的堿性磷酸酶活性,并提供用于測量干細胞未分化/分化的定量測定。
慢病毒表達載體,即通常所說的穿梭載體,包含了包裝、轉染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質??商峁┧械霓D錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感ran,目的基因進入到宿主細胞之后,經過反轉錄,整合到基因組,從而高水平的表達效應分子。
眾所周知,ai細胞有它們自己獨特的增殖方式,它是一種在幾乎所有ai癥類型中但不在正常的細胞中觀察到的精明的代謝重編程。
在一篇發(fā)表在2016年10月Cell Reports期刊上的文章“Addiction to Coupling of the Warburg Effect with Glutamine Catabolism in Cancer Cells”中,研究人員shou次證實導致ai癥的突變如何控制和改變ai細胞進行生物合成和復制的方式。
幾十年來,人們已知ai細胞以一種令人吃驚的速率從血液中攝取葡萄糖。在這篇文章中研究人員發(fā)現(xiàn):盡管葡萄糖是主要的能量來源并且是正常細胞進行生物合成的燃料,但是在ai細胞中,葡萄糖以不同的方式進行代謝。ai細胞從燃燒葡萄糖轉換到發(fā)酵葡萄糖,并且實驗室發(fā)現(xiàn)這一過程是由導致ai癥的突變驅動的。
再者,他們發(fā)現(xiàn)在ai細胞中,葡萄糖發(fā)酵促進谷氨酰胺---另一種營養(yǎng)來源---消耗。谷氨酰胺可從血液中大量獲得,而且ai細胞大量地獲取它來支持細胞分裂。
因此,研究ai細胞中的代謝途徑及代謝變化,可能為ai癥zhi療提供了一個新的方向。 科學家們設計出基于抗體的探針,讓它們純化和研究細胞內不同類型的蛋白質。
熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中*有代表性的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究。熒光素酶的具體應用,主要有以下兩個方面:(一):pGL3-Basic---用于轉錄因子結合位點與啟動子活性分析。把待分析啟動子區(qū)段構建到F-Luciferase上游,和轉錄因子共轉染分析F-Luciferase活性即可反應啟動子的活性高低。該質粒通常需要結合持續(xù)性表達R-Luciferase的載體作為內參以校正不同樣品之間轉染的轉染效率。(二):psiCHECK2---miRNA與其靶點相關分析,包括miRNA靶基因驗證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗證等。 需要把miRNA潛在結合靶點克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區(qū)域,然后與待測miRNA共同轉染細胞內測定R-Luciferase活性高低,F(xiàn)-Luciferase (hLuc+)作為校正內參校正不同樣品之間轉染的轉染效率。研究者可以利用光來檢測、測量和控制分子信號、細胞和細胞群,以便了解它們的活動。小鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)試劑盒
幾乎不受環(huán)境pH影響。小鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)試劑盒
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)是一種快速檢測臨床和實驗樣品中蛋白質含量的方法,根據(jù)研究需求,有許多方式可供選擇,如直接ELISA,間接ELISA,競爭性ELISA和夾心ELISA等。ELISA是生物學實驗常用的一種技術,其具有快速、易于操作等優(yōu)點,但當條件不合適時,其往往不能給出*佳的結果,不能保持一致性和可復制性。
ELISA是Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay的簡稱,即酶聯(lián)免疫吸附測定,是研究蛋白抗體的重要方法。它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶進行直接或間接結合,然后通過酶與底物產生顏色反應,進行定性和定量分析。1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了該方法用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發(fā)展成液體標本中微量物質的測定方法。
ELISA大致分為五種類型:直接法、間接法、競爭法、夾心法、捕獲包被法。
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1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。