細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-08-24

來(lái)源于生物體內(nèi)的熒光素,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測(cè)法或螢光素酶檢測(cè)法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的報(bào)告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動(dòng)子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控,因?yàn)樗鼈儗?duì)目的基因的調(diào)控可以是漸變的,而不是簡(jiǎn)單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,檢測(cè)幅度寬;不是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)源性基因;重復(fù)性好;與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報(bào)告并進(jìn)行均一化研究。由于它們都是快速,容易和高靈敏的監(jiān)測(cè)方法。而且螢火蟲和海腎熒光素酶是理想的雙基因報(bào)告系統(tǒng),因?yàn)樗鼈儊?lái)源于不同的生物進(jìn)化方向,蛋白結(jié)構(gòu)和底物差異都很大,在實(shí)驗(yàn)中不會(huì)產(chǎn)生相互影響。這些試劑盒旨在為各種樣品類型的AB、tau和α-突觸核/蛋白提供準(zhǔn)確、靈敏和快速的蛋白質(zhì)定量。細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒

CCK-8試劑(Cell Counting Kit-8 細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑 [1]  )中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan),生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。該方法已被廣fan用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗**藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗(yàn)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)等。細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒cck8試劑加入后孵育時(shí)間,隨著時(shí)間的增加,OD值就會(huì)增大。

腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優(yōu)勢(shì):a.是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng):腺病毒感ran細(xì)胞后,1-2天即可表達(dá),是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng);b.滴度高:腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制,可產(chǎn)生滴度為1010到1011PFU/mL的病毒;c.載體容量大:可容納不超過5kb的片段;d.不整合到染色體中,無(wú)插入致突變性:腺病毒除卵細(xì)胞以外,幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中,因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。

AAV在基因傳遞和表達(dá)的優(yōu)勢(shì)1.宿主范圍廣:隨時(shí)可轉(zhuǎn)染的 AAV 可高效感ran分裂和非分裂細(xì)胞;2.多種血清型 :AAV1,AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8 和 AAV9 等;3.安全性高:ITR 序列和 rep/cap 基因分別由獨(dú)li的質(zhì)粒表達(dá);未發(fā)現(xiàn) AAV 對(duì)人體致 病,rAAV 去除了 wtAAV 基因組的96%,進(jìn)一步保證了安全性;4.免疫原性低:AAV2 的基因組jin 4681 個(gè)核苷酸,便于用常規(guī)的重組 DNA 技術(shù)進(jìn)行操作,而且進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)造成的免疫反應(yīng)?。?.擴(kuò)散性強(qiáng):AAV可以穿透血腦屏障,是*理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)神經(jīng)下感ran工具。

源于病毒的載體系統(tǒng)作為基因遞送工具已經(jīng)在基因和細(xì)胞zhi liao領(lǐng)域應(yīng)用了多年。已經(jīng)有多種類型的病毒載體類型可以選擇使用,其中,基因和細(xì)胞zhi liao領(lǐng)域*常使用的是慢病毒(LV)、γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒(GRV)、腺病毒(AV)以及腺相關(guān)病毒(AAV)。分別源于小鼠白血病病毒和HIV的γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(GRVV)和慢病毒載體(LVV)是*常使用的兩種逆轉(zhuǎn)錄病毒。針對(duì)特定的應(yīng)用選擇病毒載體系統(tǒng)時(shí)需要考慮的主要因素包括zhi liao性GOI(目的基因)的負(fù)載量(插入大小)、免疫原性、細(xì)胞趨向性和被靶細(xì)胞攝取的效率、基因表達(dá)的持續(xù)時(shí)間以及規(guī)?;a(chǎn)的簡(jiǎn)單性。Thomas等曾總結(jié)介紹過不同的病毒載體系統(tǒng),整合vs非整合、囊膜vs無(wú)囊膜、病毒DNA基因組vs病毒RNA。此外,Patel等強(qiáng)調(diào)過每種系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì),每種載體系統(tǒng)從其各自的特性來(lái)說都是獨(dú)yi無(wú)er的,這也使其可能適合某些應(yīng)用,而不適合另一些應(yīng)用。由于其穩(wěn)定性,GFP可用于細(xì)胞家系研究中的譜系跟zong。

實(shí)驗(yàn)流程:1根據(jù)目的基因相關(guān)信息(序列,序列號(hào)等),構(gòu)建含有外源基因或siRNA的重組載體。2對(duì)于測(cè)序正確的重組質(zhì)粒,提取和純化高質(zhì)量的不含內(nèi)du素的重組質(zhì)粒。3使用高效重組載體和病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T 細(xì)胞,進(jìn)行病毒包裝和生產(chǎn),收集病毒液;4濃縮、純化病毒液。5用高質(zhì)量的病毒液感ran細(xì)胞。6通過定量PCR精確測(cè)定病毒滴度(高精確滴定方法)和Western 分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7用高質(zhì)量的病毒液感ran宿主細(xì)胞;檢測(cè)基因功能或者siRNA的沉默效率以及使用藥物進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選,通常狀況下,篩選的細(xì)胞克隆株具有長(zhǎng)期的表達(dá)穩(wěn)定性。bing毒液足夠用于一般的動(dòng)物活ti實(shí)驗(yàn)。ScienCel已經(jīng)開發(fā)出多種的細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,幫助您評(píng)估酶活性、代謝水平和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)以及干細(xì)胞研究等。細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒

熒光亮度更高,熒光偶聯(lián)物特異性好,熒光溢出效應(yīng)減弱。細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒

人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒對(duì)體內(nèi)各種重要生理功能的實(shí)現(xiàn)以及疾病的發(fā)生進(jìn)程不可或缺,如造血作用、淋巴組織發(fā)育、炎癥反應(yīng)、白細(xì)胞遷移、過敏、傷口修復(fù)、新血管生成、cancer發(fā)生和**遷移等。顧名思義,人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒的功能主要是趨化各種細(xì)胞。典型的例子,如人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒通過趨化作用向炎癥部位招募各種白細(xì)胞。

其中包括兩個(gè)步驟:首先是白細(xì)胞在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的初始性滾動(dòng)轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定性結(jié)合,并穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞層;然后,引導(dǎo)這些細(xì)胞向gan染部位遷移,遷移的方向一般是順人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 濃度梯度。而這一濃度梯度,又是由胞外基質(zhì)表面和內(nèi)皮細(xì)胞表面能結(jié)合人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 的黏蛋白含量所決定的。這就是說,白細(xì)胞一旦穿越內(nèi)皮細(xì)胞和基底膜進(jìn)入組織,它們就沿著基質(zhì)所結(jié)合的遞增性人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 濃度向炎癥部位游走。         細(xì)胞自噬染色檢測(cè)試劑盒

上海中喬新舟生物科技有限公司

1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。