Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FcRn Protein

酵母重組表達的N-糖苷酶F（PNGaseF）在實際應用中具有以下優(yōu)勢：1.**高比活性**：具有高達750,000U/mL的比活性，這表明該酶在催化反應中具有很高的效率。2.**快速反應**：新型的FastPNGaseF能在數分鐘內完成徹底且無偏好性的去糖基化，縮短了實驗時間。3.適用性：PNGaseF可以用于天然或變性條件下的糖蛋白或糖多肽的去N-糖基化修飾。4.**無其他糖苷酶活性**：該酶專一性高，無其他糖苷酶活性，確保了實驗結果的準確性。5.**His標簽**：帶有His標簽，便于通過親和層析進行純化和檢測。6.**穩(wěn)定性和儲存條件**：在含有50%甘油的儲存緩沖液中，-15~-25℃保存，有效期長達1年。7.**簡化的實驗流程**：FastPNGaseF簡化了實驗流程，減少了實驗時間，同時保持了靈敏度和重復性。8.**兼容性好**：去糖基化后的產物可以直接用于下游的色譜或質譜分析，無需額外的純化步驟。9.**無偏好性**：能夠迅速且無偏好性地去除所有的N-糖鏈，確保了獲得的糖鏈分布能夠表示抗體的正確組成。UBE2L3與其他E2酶的區(qū)別在于它具有特定的結構特征，它包含一個高度保守的UBC結構域，這是E2酶家族的標志。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FcRn Protein,His Tag

在基因編輯中，除了NLS-Cas9-EGFPNuclease，還有多種技術可以提高編輯的特異性，這些技術包括：1.**高保真Cas9變體**：通過工程化改造Cas9蛋白，例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真變體，可以減少脫靶效應，提高特異性。2.**堿基編輯器（BaseEditors）**：這類編輯器可以在不產生DNA雙鏈斷裂的情況下直接在特定位置進行單個堿基的轉換，從而減少非目標編輯。3.**引導編輯器（PrimeEditors）**：由哈佛大學劉如謙教授團隊開發(fā)的引導編輯器可以在不依賴DNA雙鏈斷裂和同源定向修復的情況下，實現精細的基因組編輯。4.**CRISPRi和CRISPRa**：這兩種技術分別用于抑制或激起特定基因的表達，而不切割DNA，從而減少了脫靶風險。5.**新型CRISPR系統(tǒng)**：例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ，這些系統(tǒng)可能具有不同的PAM序列要求和更高的特異性。6.**AI輔助設計**：利用人工智能預測和優(yōu)化sgRNA的設計，以減少脫靶效應。7.**優(yōu)化遞送系統(tǒng)**：改進CRISPR組分的遞送方法，例如使用核糖核的蛋白（RNP）復合物，可以提高編輯效率和特異性。8.轉座子編輯系統(tǒng)：利用轉座子進行基因組編輯，可以在不依賴DNA雙鏈斷裂的情況下實現大片段DNA序列的插入。

SpCas9蛋白（來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白）在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶，能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用：1.**識別和結合**：SpCas9蛋白與一個單導向RNA（sgRNA）結合，形成RNP復合物。這個復合物能夠識別并結合到基因組中與sgRNA互補的特定DNA序列。2.**PAM序列識別**：SpCas9需要一個稱為原間隔子相鄰基序（PAM）的特定序列作為識別目標DNA的先決條件。對于SpCas9，這個PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**：一旦RNP復合物與目標DNA結合，SpCas9就會在PAM序列的3個堿基對的上游位置切割DNA雙鏈，產生一個雙鏈斷裂（DSB）。4.**引發(fā)DNA修復**：DNA雙鏈斷裂觸發(fā)細胞的DNA修復機制，包括同源定向修復（HDR）和非同源末端連接（NHEJ）。研究人員可以利用這些修復機制來插入、刪除或替換特定的DNA序列。5.**基因修改**：通過HDR，可以在斷裂的DNA兩端引入特定的DNA模板，從而實現精確的基因編輯。而NHEJ通常會導致小的插入或缺失（indel），這可以用來產生基因的敲除或敲入。6.**提高編輯效率**：為了提高SpCas9的編輯效率，研究人員可能會使用優(yōu)化的sgRNA設計、蛋白質工程或嵌合融合蛋白等策略。

NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白，它在N端和C端都添加了核定位信號（NLS），這使得它能夠更有效地進入細胞核并進行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導RNA（gRNA）形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白（RNP）復合物，可以在進入細胞后立即定位到細胞核，從而誘導特定的DNA雙鏈斷裂，實現基因編輯。與傳統(tǒng)的mRNA或質粒系統(tǒng)相比，使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉錄和翻譯過程，因此可以避免將外源DNA插入基因組的風險，這對于基因編輯尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特點包括：1.無DNA：系統(tǒng)不添加外部DNA，降低了插入外源DNA的風險。2.高切割效率：雙NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核。3.低脫靶效應：Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性。4.節(jié)省時間：無需轉錄和翻譯過程。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA，以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內基因編輯。產品的保存條件通常是在-25~-15℃，有效期為一年。使用時，可以根據推薦的反應體系進行體外DNA裂解實驗，并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率。具體產品的詳細信息和應用指南，可以參考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料。FnCas12a在切割DNA時產生黏性末端，有助于提高同源定向修復（HDR）的效率。

檢測重組EGFP（增強型綠色熒光蛋白）的活性和穩(wěn)定性通常涉及一系列生物化學和分子生物學實驗方法。以下是一些常用的檢測方法：1.**SDS-PAGE電泳**：-通過SDS-PAGE電泳分析EGFP的純度和分子量。-觀察是否有蛋白質降解或聚合的跡象。2.**WesternBlot**：-使用特異性的GFP抗體進行Westernblot，以檢測EGFP蛋白的存在和大小。-可以評估EGFP的表達水平和純度。3.**熒光光譜分析**：-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發(fā)和發(fā)射光譜。-評估熒光強度和比較大激發(fā)/發(fā)射波長，以確定其熒光特性。4.**流式細胞儀分析**：-如果EGFP融合蛋白表達在細胞中，可以使用流式細胞儀分析細胞群體的熒光強度。-這有助于評估EGFP的表達水平和細胞內分布。5.**熒光顯微鏡觀察**：-在熒光顯微鏡下觀察EGFP的亞細胞定位和表達模式。-通過時間序列成像，可以評估EGFP在活細胞中的動態(tài)變化和穩(wěn)定性。6.**熱穩(wěn)定性分析**：-通過逐漸升高溫度并測量熒光強度的變化，可以評估EGFP的熱穩(wěn)定性。-熱穩(wěn)定性差的EGFP可能會在高溫下迅速失去活性。7.**光穩(wěn)定性測試（光漂白實驗）**：-通過持續(xù)光照并監(jiān)測熒光強度的下降（光漂白），可以評估EGFP的光穩(wěn)定性。泛素從E1轉移到泛素結合酶E2的活性位點半胱氨酸殘基上，形成E2-泛素硫酯中間體。Recombinant Mouse GIP Protein,hFc Tag

CRISPR/Cas12a 是一種單一的RNA引導的核酸內切酶，通過CRISPR/Cas9系統(tǒng)為靶向基因組工程提供了新的機會。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque FcRn Protein,His Tag

IdeSProtease是一種免疫球蛋白G（IgG）特異性降解酶，它能夠在IgG的鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點進行切割，產生F(ab')2和Fc片段。這種酶是通過大腸桿菌（E.coli）表達系統(tǒng)重組表達生產的，并且經過分子改造，使其具有更高的酶活和更廣的底物特異性。在生產過程中，確保IdeSProtease符合GMP（良好生產規(guī)范）標準，需要進行以下步驟：1.**分子改造**：通過分子生物學技術對IdeS進行改造，增強其穩(wěn)定性和比活性。2.**大腸桿菌表達系統(tǒng)**：利用大腸桿菌表達系統(tǒng)進行IdeS的重組表達，確保無動物源性成分，減少病毒污染風險。3.**純化**：通過高度純化過程，確保IdeS的純度達到≥95%。4.**酶活定義**：1個酶活力單位定義為在37°C條件下，30分鐘內酶切1μg重組單克隆IgG所需的酶量。5.**質量控制**：每批產品都經過嚴格的質量控制，以確保產品批間穩(wěn)定性和高穩(wěn)定性。6.**儲存條件**：采用適當的儲存條件，如-30℃至-10℃凍存，確保產品在有效期內保持活性和穩(wěn)定性。7.**微生物學安全性檢測**：進行無菌檢測、體內有毒物質的檢測、抗生物質殘留檢測、宿主細胞蛋白殘留檢測和病毒安全性檢測，確保產品符合微生物學安全性要求。