按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基,稱為基本培養(yǎng)基,是含有營(yíng)養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長(zhǎng)因子,所以經(jīng)過(guò)誘變過(guò)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng)。2.完全培養(yǎng)基,基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后,叫完全培養(yǎng)基,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要,常以“[+]”表示。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基,凡是只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)需要的組合培養(yǎng)基,稱為補(bǔ)充培養(yǎng)基,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營(yíng)養(yǎng)因子代...
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按用途分類:根據(jù)用途不同,培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等。基礎(chǔ)培養(yǎng)基(basic media) 大多數(shù)微生物共同需要的營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎(chǔ)上添加某種成分即可,如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂等。1%蛋白胨水培養(yǎng)基便是一個(gè)較簡(jiǎn)單的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,該基礎(chǔ)培養(yǎng)基本身可供一般細(xì)菌增菌培養(yǎng)和靛基質(zhì)試驗(yàn)用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fā)酵培養(yǎng)基,供糖發(fā)酵試驗(yàn)用,成為鑒別培養(yǎng)基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,則變成堿性蛋白胨水,用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng),成為專門用的增菌培養(yǎng)基。...
選擇性培養(yǎng)基(selective media) 選擇性培養(yǎng)基含有營(yíng)養(yǎng)物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標(biāo)本接種于此類培養(yǎng)基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的增菌培養(yǎng),再接種于選擇性鑒別培養(yǎng)基,可以提高目的菌的陽(yáng)性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準(zhǔn)確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時(shí)須特別注意。培養(yǎng)基根據(jù)功能分為選擇性培養(yǎng)基、區(qū)分性培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基等。大腸桿菌MS2噬菌體液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對(duì)所...
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)...
培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需,濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用,例如高濃度糖類物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng),反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴(yán)格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過(guò)程中,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí),菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí),菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則...
選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.02%,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%無(wú)機(jī)培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細(xì)菌到研究微生物生理生化特性都普遍應(yīng)用。植物組織培養(yǎng)基 N6 培養(yǎng)基(...
培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過(guò)7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)培養(yǎng)基在配制培養(yǎng)基...
培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需,濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用,例如高濃度糖類物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng),反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴(yán)格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過(guò)程中,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí),菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí),菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則...
上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,厭氧菌培養(yǎng)基(anaerobic media) 供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,稱為厭氧菌培養(yǎng)基。由于厭氧菌自身缺乏有氧代謝所必需的各種酶,如細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶、過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代謝的缺陷,無(wú)法進(jìn)行有氧代謝,而無(wú)氧酵解所產(chǎn)生的能量又不足,因此厭氧菌在正常的大氣環(huán)境下不能生長(zhǎng)和生存。為使厭氧菌能正常生長(zhǎng),必須制備營(yíng)養(yǎng)成分豐富,氧化還原電勢(shì)較低,具有特殊生長(zhǎng)因子的專門用的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基應(yīng)適合不同類型細(xì)菌的生長(zhǎng),包括需氧菌和厭氧菌。PYG培養(yǎng)基培養(yǎng)基不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F...
長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,常常需要調(diào)整培養(yǎng)基的組成和配方,以優(yōu)化細(xì)胞或微生物的生長(zhǎng)和功能表現(xiàn)。Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基(differential...
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基。Dubos肉湯基礎(chǔ)添加劑培養(yǎng)基 細(xì)菌培養(yǎng)基之面粉瓊脂培養(yǎng)基:面粉60g,瓊...
長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無(wú)菌技術(shù),避免細(xì)菌交叉污染。改良霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液添加劑培養(yǎng)基 細(xì)菌培養(yǎng)基之面粉瓊脂培養(yǎng)基:面粉60g,瓊脂20...
培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過(guò)指示劑的反應(yīng)不同來(lái)鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長(zhǎng),有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長(zhǎng)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長(zhǎng)、染色及細(xì)胞背景下的細(xì)胞培養(yǎng)等方面。霉菌瓊脂培養(yǎng)基 GB培...
按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:鑒別培養(yǎng)基,一類在成分中加有能與目的菌的無(wú)色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如,伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基(EMB)。培養(yǎng)基的分類有哪些?培養(yǎng)基按功能用途可分為幾種?培養(yǎng)基的分類有哪些?培養(yǎng)基按功能用途可分為幾種?常見(jiàn)的培養(yǎng)基有細(xì)菌培養(yǎng)基、牛心培養(yǎng)基、根瘤菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、面粉瓊脂培養(yǎng)基、微藻培養(yǎng)基、豆芽汁培養(yǎng)基、食用菌菌種培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基等等。培養(yǎng)基根據(jù)其組成、用途、酸堿度等不同因素分類,如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基等。馬丁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-16...
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響,可以通過(guò)純化技術(shù)去除,但酚紅在無(wú)血清培養(yǎng)基可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長(zhǎng),當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國(guó)外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。微生物的供能方式會(huì)影響它對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用,因此不同微生物需要不同成分的培...
要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對(duì)所用器材及工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。對(duì)培養(yǎng)基而言,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過(guò)程中,長(zhǎng)時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,某些對(duì)糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進(jìn)行過(guò)濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基。無(wú)機(jī)鹽淀粉瓊脂培養(yǎng)基還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細(xì)菌...
近年來(lái),國(guó)內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實(shí)際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時(shí),使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對(duì)位硝基酚、對(duì)硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前...
細(xì)菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基:牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化鈉0.5g,瓊脂1.5g,水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2-7.6,分裝在各個(gè)試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌:1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基:取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào),煮沸,轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過(guò)濾,濾出的肉末干燥處...
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)...
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基,一類含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。2.加富培養(yǎng)基,一類在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血、血清、動(dòng)植物組織提取液制成的培養(yǎng)基。用于培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物。3.選擇培養(yǎng)基,一類根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能,普遍用于菌種篩選等領(lǐng)域。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB)培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白...
天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測(cè)...
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。雜質(zhì)會(huì)影響培養(yǎng)基的成分,因此制備培養(yǎng)基時(shí)需要進(jìn)行滅菌。MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA-MUG)培養(yǎng)基培養(yǎng)基分類有哪些?營(yíng)養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或者自然突變失去合成某...
L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長(zhǎng)的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時(shí)間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給,也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-...
按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分:1.基本培養(yǎng)基,亦稱“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基,稱為基本培養(yǎng)基,是含有營(yíng)養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基,常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長(zhǎng)因子,所以經(jīng)過(guò)誘變過(guò)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng)。2.完全培養(yǎng)基,基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后,叫完全培養(yǎng)基,也叫(血清)細(xì)胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要,常以“[+]”表示。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基,凡是只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)需要的組合培養(yǎng)基,稱為補(bǔ)充培養(yǎng)基,它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營(yíng)養(yǎng)因子代...
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號(hào)之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時(shí)務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號(hào),對(duì)不同來(lái)源的原料應(yīng)先做小樣試驗(yàn)。此種培養(yǎng)基成本較低,細(xì)菌繁殖較好,一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長(zhǎng)、染色及細(xì)胞背景下的細(xì)胞培養(yǎng)等方面。氯化鈉胰蛋白胨稀釋液培養(yǎng)基近年來(lái),國(guó)內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)...
在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營(yíng)養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強(qiáng)的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動(dòng)。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過(guò)程中能用到。常見(jiàn)的細(xì)菌類培養(yǎng)基包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌...
培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過(guò)指示劑的反應(yīng)不同來(lái)鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長(zhǎng),有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長(zhǎng)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類。胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎(chǔ)培養(yǎng)...
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來(lái)維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。常見(jiàn)的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,YPD培養(yǎng)基,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。GC肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)...
近年來(lái),國(guó)內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實(shí)際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時(shí),使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對(duì)位硝基酚、對(duì)硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前...
還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細(xì)菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質(zhì)而產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)堿或產(chǎn)生其他可見(jiàn)物質(zhì),依此進(jìn)行細(xì)菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細(xì)菌生化特性試驗(yàn)的培養(yǎng)基特點(diǎn)是在無(wú)糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加人某種特定的基質(zhì),并加人指示劑,細(xì)菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應(yīng)結(jié)果,均通過(guò)指示劑顯示出來(lái)。此類培養(yǎng)基為生化反應(yīng)鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗(yàn)培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況嚴(yán)格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。生長(zhǎng)細(xì)胞需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、微量元素和維生...