如何有效避免培養(yǎng)基污染？做好實(shí)驗(yàn)操作規(guī)則：在實(shí)驗(yàn)中制定好統(tǒng)一意識(shí)的操作規(guī)則至關(guān)重要。例如，制定有關(guān)實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)中洗手、換鞋、穿戴實(shí)驗(yàn)服的規(guī)定。還要保證操作的環(huán)境衛(wèi)生、實(shí)驗(yàn)材料消毒等等。這樣可以降低實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的細(xì)菌來(lái)源，保證實(shí)驗(yàn)材料的純度，同時(shí)也可以提高操作人員的自覺(jué)性和流程規(guī)范性，然后避免因人為原因而產(chǎn)生的污染。做好培養(yǎng)基制作：在培養(yǎng)基的制作過(guò)程中，一些常見(jiàn)的問(wèn)題往往會(huì)導(dǎo)致污染，例如：不干凈的試管，不潔凈的機(jī)器設(shè)備，不正確的過(guò)濾操作和培養(yǎng)基儲(chǔ)存不當(dāng)?shù)?。為了避免這些問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)該采用高標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)原料，在制作培養(yǎng)基前徹底清洗操作區(qū)，并使用無(wú)菌試管及機(jī)器設(shè)備，千萬(wàn)不要盲目省事不進(jìn)行適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)準(zhǔn)...

預(yù)裝培養(yǎng)基的有效期是指由于技術(shù)和保質(zhì)問(wèn)題而限定的使用時(shí)限。雖然預(yù)裝培養(yǎng)基在生產(chǎn)過(guò)程中基本上是消毒處理的，但是在使用過(guò)程中，仍然會(huì)存在著微生物和其他污染因素對(duì)培養(yǎng)基的影響。因此，即使保質(zhì)期未過(guò)，在使用之前也應(yīng)檢查其質(zhì)量，并確保其適用于實(shí)驗(yàn)的要求。一般情況下，市售的預(yù)裝培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為6-12個(gè)月，但是這只是一個(gè)約定值，并不是通用值。在制造過(guò)程中，每個(gè)廠家都會(huì)考慮到不同的因素，如培養(yǎng)基成分、凝膠結(jié)構(gòu)、包裝方式和儲(chǔ)存條件等，保質(zhì)期因此也不一樣。因此，在購(gòu)買(mǎi)預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí)，我們應(yīng)該認(rèn)真查看其保質(zhì)期，以便判斷其可行性。固體培養(yǎng)基則通過(guò)向液態(tài)培養(yǎng)基中加入凝膠劑來(lái)制成，以便在培養(yǎng)過(guò)程中提供可視化定位細(xì)胞的...

干粉培養(yǎng)基有著良好的經(jīng)濟(jì)性和生態(tài)環(huán)境特點(diǎn)。它可以使用更少的儀器和設(shè)備，且在瓶子空間小的情況下完成實(shí)驗(yàn)，使其更加具有成本效益和生態(tài)環(huán)境特點(diǎn)。干粉培養(yǎng)基的配制不需要添加大量水，成品體積相對(duì)較小，因此比液體培養(yǎng)基更加穩(wěn)定，更容易存儲(chǔ)和運(yùn)輸。這意味著可以在不同的地方使用相同的干粉培養(yǎng)基，從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。干粉培養(yǎng)基有許多優(yōu)點(diǎn)，包括長(zhǎng)期存儲(chǔ)穩(wěn)定、配制方便、可自由調(diào)整、成本更加經(jīng)濟(jì)、易于運(yùn)輸?shù)?。因此，在?shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，干粉培養(yǎng)基是一種非常可靠的選擇，值得研究者的信任和使用。培養(yǎng)基根據(jù)其組成、用途、酸堿度等不同因素分類(lèi)，如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基等。SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)基 細(xì)菌...

天然培養(yǎng)基是指一類(lèi)利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類(lèi)鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等...

培養(yǎng)基在醫(yī)學(xué)上也有著普遍的應(yīng)用。病原微生物的病理生理學(xué)研究和臨床醫(yī)療常常需要使用培養(yǎng)基。例如，在病原體研究中，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常常要利用各種培養(yǎng)基技術(shù)來(lái)分離和鑒定病原體、判斷病原體對(duì)藥物的敏感性和抗藥性、以及預(yù)測(cè)疾病的發(fā)展和蔓延趨勢(shì)等。培養(yǎng)基還在食品、環(huán)境、制藥等領(lǐng)域中得到普遍應(yīng)用。食品中常常需要檢測(cè)生菌和檢驗(yàn)產(chǎn)品的污染，環(huán)境中也需要快速監(jiān)測(cè)和診斷各種細(xì)菌和病毒等微生物因素。制藥行業(yè)則需要選擇較適合的培養(yǎng)基，以提高某種微生物的產(chǎn)量和制備質(zhì)量等。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類(lèi)。淀粉酪蛋白瓊脂（SCA）培養(yǎng)基干粉培養(yǎng)基在制備過(guò)程中必須加水。這是因?yàn)檫@種培養(yǎng)基是以干燥的粉末形式保存...

預(yù)裝培養(yǎng)基可以給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)諸多好處。首先，它節(jié)省了實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的工作時(shí)間，從而提高實(shí)驗(yàn)時(shí)間的利用效率。因?yàn)槭止ぶ苽渑囵B(yǎng)基需要耗費(fèi)大量的時(shí)間和精力，這增加了實(shí)驗(yàn)人員的負(fù)擔(dān)。通過(guò)使用預(yù)裝培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)室工作人員可以減少時(shí)間和勞動(dòng)力的浪費(fèi)，從而將更多的精力投入到實(shí)驗(yàn)研究中。預(yù)裝培養(yǎng)基也可以提高實(shí)驗(yàn)的安全性，因?yàn)樵谑止ぶ苽渑囵B(yǎng)基時(shí)可能存在交叉病變的風(fēng)險(xiǎn)。在實(shí)驗(yàn)中，微生物之間的影響需要特別注意，如果不注意衛(wèi)生和消毒，則可能造成影響的擴(kuò)散。使用預(yù)裝培養(yǎng)基可以降低這種影響和污染的風(fēng)險(xiǎn)，從而提高實(shí)驗(yàn)室的安全性。在制備培養(yǎng)基時(shí)，要注意保持一定的 pH 值。Littman瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基(syntheti...

培養(yǎng)基的pH值對(duì)微生物的生長(zhǎng)和繁殖有著重要的影響，因此有時(shí)候培養(yǎng)基會(huì)按照pH值的范圍進(jìn)行分類(lèi)。中性培養(yǎng)基的pH值約為7.4，這種培養(yǎng)基適合于大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)繁殖，例如生長(zhǎng)基（Nutrient Agar）就是一種中性培養(yǎng)基。酸性培養(yǎng)基的pH值在5.5到6.5之間，適用于某些菌株，如乳酸桿菌、酸性乳桿菌等。堿性培養(yǎng)基的pH值超過(guò)7.0，是為了培養(yǎng)生長(zhǎng)于高pH環(huán)境的微生物，例如氫氧化物耐受乙酸桿菌等。預(yù)裝培養(yǎng)基還可以根據(jù)其使用目的進(jìn)一步分類(lèi)。細(xì)菌富集培養(yǎng)基：細(xì)菌富集培養(yǎng)基的目的是收集低濃度的微生物，通常在自然樣品中存在非常少量的微生物，因此必須富集到足夠的量，才能進(jìn)行接下來(lái)的試驗(yàn)。這種培養(yǎng)基通常添...

對(duì)于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲(chǔ)存溫度應(yīng)該是在 4℃ 到 8℃ 的范圍內(nèi)。這是因?yàn)轭A(yù)裝培養(yǎng)基中含有大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這些物質(zhì)在常溫下很容易被微生物利用，從而失去營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。同時(shí)，4℃ 到 8℃ 的溫度可以有效地防止微生物的生長(zhǎng)和繁殖，從而保證培養(yǎng)基的質(zhì)量和效果。對(duì)于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件應(yīng)該是“干燥、陰涼、避光和密封”。這是因?yàn)轭A(yù)裝培養(yǎng)基中含有一定比例的水分，如果儲(chǔ)存條件不當(dāng)，就會(huì)導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)和繁殖，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，我們需要選擇干燥、陰涼、避光和密封的地方進(jìn)行存儲(chǔ)。在存儲(chǔ)時(shí)，應(yīng)該避免陽(yáng)光直射、潮濕和高溫的環(huán)境，以免影響預(yù)裝培養(yǎng)基的質(zhì)量和穩(wěn)定性。同時(shí)，在儲(chǔ)存過(guò)程中，應(yīng)該注意避免磕碰和摔落，提高預(yù)...

要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對(duì)所用器材及工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。對(duì)培養(yǎng)基而言，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過(guò)程中，長(zhǎng)時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞，如使糖類(lèi)物質(zhì)形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌，某些對(duì)糖類(lèi)要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進(jìn)行過(guò)濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。微生物的供能方式會(huì)影響它對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基。3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)...

天然培養(yǎng)基血清種類(lèi)：目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因：來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解。牛血清對(duì)絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)比較高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞...

按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分：1.基本培養(yǎng)基，亦稱(chēng)“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基，稱(chēng)為基本培養(yǎng)基，是含有營(yíng)養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基，常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長(zhǎng)因子，所以經(jīng)過(guò)誘變過(guò)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng)。2.完全培養(yǎng)基，基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后，叫完全培養(yǎng)基，也叫（血清）細(xì)胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要，常以“[+]”表示。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基，凡是只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)需要的組合培養(yǎng)基，稱(chēng)為補(bǔ)充培養(yǎng)基，它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營(yíng)養(yǎng)因子代...

對(duì)于已經(jīng)購(gòu)買(mǎi)來(lái)的預(yù)裝培養(yǎng)基，其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無(wú)菌的。因此，在通常情況下，我們不需要對(duì)新的預(yù)裝培養(yǎng)基進(jìn)行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前，檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無(wú)菌，便可以直接使用。在使用過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，避免外界微生物的污染。對(duì)于需要自制的培養(yǎng)基而言，其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分，那么在自制之后就需要進(jìn)行消毒處理，以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后，再將培養(yǎng)基裝入瓶中，就可以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)使用。同時(shí)，在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí)，需要嚴(yán)格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境等參數(shù)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。無(wú)論是選擇何種種類(lèi)的培養(yǎng)基，都...

長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí)，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑，避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變（一般使pH降低），可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求，在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。常見(jiàn)的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基，YPD培養(yǎng)基，M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。馬鈴薯浸出液瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基分類(lèi)有哪些？營(yíng)養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或者自然...

培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需，濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用，例如高濃度糖類(lèi)物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)，反而起到抑菌或殺菌作用。另外，培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和（或）代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比（C/N）的影響較大。嚴(yán)格地講，碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值，有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如，在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過(guò)程中，培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí)，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產(chǎn)量則...

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長(zhǎng)因子（維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等）等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。半固態(tài)培養(yǎng)基是一種介于液態(tài)培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基之間的混合形式，常用于篩選微生物菌株。溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基(diffe...

按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分是否完全區(qū)分：1.基本培養(yǎng)基，亦稱(chēng)“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基，稱(chēng)為基本培養(yǎng)基，是含有營(yíng)養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基，常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長(zhǎng)因子，所以經(jīng)過(guò)誘變過(guò)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能生長(zhǎng)。2.完全培養(yǎng)基，基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后，叫完全培養(yǎng)基，也叫（血清）細(xì)胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要，常以“[+]”表示。3.補(bǔ)充培養(yǎng)基，凡是只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)需要的組合培養(yǎng)基，稱(chēng)為補(bǔ)充培養(yǎng)基，它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營(yíng)養(yǎng)因子代...

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi)，以滿足不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類(lèi)微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同，一般來(lái)講，細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng)，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。值得注意的是，在微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程中，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化，若不對(duì)培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制，往往導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)速度下降或（和）代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此，為了維持培養(yǎng)基pH的相對(duì)恒定，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，...

天然培養(yǎng)基血清種類(lèi)：目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因：來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理解。牛血清對(duì)絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)比較高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞...

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的，細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分來(lái)維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異，需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型判斷。牛肉精蛋白胨培養(yǎng)基是常用的富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，適用于快速生長(zhǎng)的微生物。植物組織培養(yǎng)基 MS 培養(yǎng)基...

細(xì)胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存、運(yùn)輸活組織及細(xì)胞的液體，實(shí)質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長(zhǎng)和繁殖的能力。由于其成分?jǐn)?shù)量明確并可通過(guò)調(diào)節(jié)某一種成分來(lái)觀察被研究對(duì)象的各種生物學(xué)改變，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)科的研究。細(xì)胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機(jī)離子、生長(zhǎng)因子等，這些成分必須通過(guò)嚴(yán)格挑選，嚴(yán)格測(cè)試后方可使用，所用的水必須達(dá)到2級(jí)試驗(yàn)用水(CB/T 6682-1992)，所用的器皿必須清潔無(wú)污并進(jìn)行高壓滅菌或干烤去熱源處理。特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。蔗糖胰蛋白...

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來(lái)源少，價(jià)格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、...

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來(lái)源少，價(jià)格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、...

選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基：葡萄糖5%，尿素0.1%，硫化銨0.1%，磷酸二氫鉀0.25%，磷酸氫二鈉0.05%，七水合硫酸鎂0.1%，七水合硫酸鐵0.01%，酵母膏0.05%，孟加拉紅0.003%，pH4.5。富集好氧自生固氮菌：甘露醇1%，磷酸二氫鉀0.02%，七水合硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.02%，二水合硫酸鈣0.01%，碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基的配方也會(huì)受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響，因此，在實(shí)際應(yīng)用中需要不斷進(jìn)行調(diào)整和改進(jìn)。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(...

HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s（2.2g/L） 中比在 Hanks′（0.35g/L）中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡，以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagle′s液，如果只是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō)，細(xì)胞耐...

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長(zhǎng)因子（維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等）等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。培養(yǎng)基也有不同的形態(tài)，可以是液體、半固體或固體形式。改良阿須貝(Ashby)無(wú)氮瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的，細(xì)...

培養(yǎng)基分類(lèi)有哪些？營(yíng)養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或者自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)（氨基酸，維生素，核酸等）的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng)，稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)缺陷型（auxotroph）。營(yíng)養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株，它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列，如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變，由該基因所控制的酶合成受阻，該菌株也因此不能合成某種營(yíng)養(yǎng)因子，使正常代謝失去平衡。半固態(tài)培養(yǎng)基是一種介于液態(tài)培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基之間的混合形式，常用于篩選微生物菌株。AN厭氧瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)基是高中生物很重要的一個(gè)知識(shí)點(diǎn)，種類(lèi)多且復(fù)雜，所以學(xué)起來(lái)也是比較難的。下面小編...

在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。例如，在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國(guó)農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。培養(yǎng)基是一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)混合物，可以為細(xì)...

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來(lái)源少，價(jià)格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、...

培養(yǎng)基按成分分類(lèi)有哪些？按形態(tài)分類(lèi)：培養(yǎng)基按其不同的物理狀態(tài)，可分為液體、流體、半固體和固體4類(lèi)，培養(yǎng)基的物理狀態(tài)取決于培養(yǎng)基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養(yǎng)基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑，常溫下以完全液態(tài)存在的培養(yǎng)基，如肉湯培養(yǎng)基或一般液體增菌培養(yǎng)基。2、流體培養(yǎng)基(semi-liquidmedium)在液體培養(yǎng)基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉，使其具一定黏度，即成流體培養(yǎng)基。加入瓊脂粉增加了培養(yǎng)基的黏度，降低空氣中的氧氣進(jìn)人培養(yǎng)基的速度，能使培養(yǎng)基保持較長(zhǎng)時(shí)間的厭氧條件，有利于一般厭氧菌的生長(zhǎng)繁殖，如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基等。一般用...

什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響，可以通過(guò)純化技術(shù)去除，但酚紅在無(wú)血清培養(yǎng)基可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長(zhǎng)，當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分，很多國(guó)外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。研究表明，酚紅可以模擬固醇類(lèi)的作用。為避免固醇類(lèi)反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類(lèi)細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。如果細(xì)菌的生長(zhǎng)受到限制，可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì)，例如控制...