總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成。例如,培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillus thiooxdans)的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。培養(yǎng)基可以分為有機(jī)培養(yǎng)基和無機(jī)...
總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成。例如,培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillus thiooxdans)的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。Luria-Bertani 培...
選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.02%,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%培養(yǎng)基是一種營養(yǎng)物質(zhì)混合物,可以為細(xì)胞提供生長所需的物質(zhì)。七葉苷鐵瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),...
近年來,國內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實(shí)際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時,使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前...
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種...
胰島素(Insulin)作用普遍,包括調(diào)節(jié)脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細(xì)胞生長等。胰島素功能的發(fā)揮源于其對細(xì)胞的作用,進(jìn)而引起組織乃至機(jī)體的整體反應(yīng)。一般可將胰島素在細(xì)胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長作用、以及代謝和促生長混合作用。胰島素對細(xì)胞的代謝調(diào)節(jié)作用主要是通過其與細(xì)胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導(dǎo),而胰島素對細(xì)胞的促生長作用則是通過其與細(xì)胞膜上胰島素的樣生長的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導(dǎo)的。在無血清細(xì)胞培養(yǎng)液中,常添加胰島素來維持細(xì)胞生長,調(diào)節(jié)細(xì)胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時抑制糖原、蛋...
培養(yǎng)基的種類是檢驗(yàn)技士考試需要掌握的內(nèi)容,小編為大家搜集整理如下,希望可以幫助大家復(fù)習(xí)掌握。(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?;A(chǔ)培養(yǎng)基普遍用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn),也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長因子的細(xì)菌生長。常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。血肉湯是含有動物紅細(xì)胞和肉浸出物的液體培養(yǎng)基,適用于需要求血因子的微生物。亞硫酸鹽多粘菌素磺胺嘧啶瓊脂(SPS)添加劑培養(yǎng)基培養(yǎng)基是高中生物很重要的一個知識點(diǎn),種類多且復(fù)雜,所以學(xué)...
天然培養(yǎng)基血清種類:目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因:來源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過長時間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞...
細(xì)胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存、運(yùn)輸活組織及細(xì)胞的液體,實(shí)質(zhì)為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。由于其成分?jǐn)?shù)量明確并可通過調(diào)節(jié)某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學(xué)改變,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)科的研究。細(xì)胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)離子、生長因子等,這些成分必須通過嚴(yán)格挑選,嚴(yán)格測試后方可使用,所用的水必須達(dá)到2級試驗(yàn)用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必須清潔無污并進(jìn)行高壓滅菌或干烤去熱源處理。培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術(shù),避免...
在配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價值。例如,在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中,常常利用糖蜜(制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液)、乳清(乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液)、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液(造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如,工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料,而在我國農(nóng)村,已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外,大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品,如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。在培養(yǎng)細(xì)胞時通常還需要添加藥物,以防...
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。無機(jī)培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細(xì)菌到研究...
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。在實(shí)際應(yīng)用過程中,常常需要調(diào)整培養(yǎng)基的組成和配方,以...
近年來,國內(nèi)外利用某些細(xì)菌特有的酶,選擇相應(yīng)的作用底物,研制出某些細(xì)菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實(shí)際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細(xì)菌作用底物的結(jié)合物加于培養(yǎng)基中,當(dāng)細(xì)菌含有相應(yīng)酶時,使該結(jié)合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結(jié)合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結(jié)合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質(zhì)分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前...
在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細(xì)菌生長,促進(jìn)目的菌的繁殖,并使所生長的細(xì)菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基。如SS瓊脂,在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應(yīng)底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖,其菌落為無色。如細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應(yīng)生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達(dá)到鑒別的目的。特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增...
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長,一般以+0.3—+0.4V為宜,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進(jìn)行好氧呼吸,在+0.1V以下時進(jìn)行發(fā)酵。F值與氧分壓和pH有關(guān),也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。培養(yǎng)基還可以根據(jù)所需生長的微生物類別,加入特定的營養(yǎng)物質(zhì),例如血清、血紅蛋白等等。葡萄糖...
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。如果細(xì)菌的生長受到限制,可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì),例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量。強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基 USP/EP培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞...
培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基,適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng)。M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基培養(yǎng)基什...
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)...
在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強(qiáng)的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過程中能用到。微生物的供能方式會影響它對營養(yǎng)物質(zhì)的利用,因此不同微生物需要不同成分...
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長,一般以+0.3—+0.4V為宜,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進(jìn)行好氧呼吸,在+0.1V以下時進(jìn)行發(fā)酵。F值與氧分壓和pH有關(guān),也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。在培養(yǎng)細(xì)胞時通常還需要添加藥物,以防止細(xì)菌污染。BM7培養(yǎng)基 ATCC培養(yǎng)基2870培養(yǎng)...
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。培養(yǎng)基可以分為有機(jī)培養(yǎng)基和無機(jī)培養(yǎng)基兩類。BG11瓊...
培養(yǎng)基的種類是檢驗(yàn)技士考試需要掌握的內(nèi)容,小編為大家搜集整理如下,希望可以幫助大家復(fù)習(xí)掌握。(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?;A(chǔ)培養(yǎng)基普遍用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn),也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長因子的細(xì)菌生長。常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基,適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng)。改良Gorodkowa瓊脂培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各...
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。麥芽汁瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、...
培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細(xì)菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長,有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基。慶大霉素溶液培養(yǎng)基細(xì)菌培養(yǎng)基之...
培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。某些培養(yǎng)基會在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化,例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的...
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,...
營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等,可供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌在其中生長。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長;結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。比較常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基,用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng),可泛用,也可專門用的,在專門用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或生長因子。培養(yǎng)基的pH值需要根據(jù)不同微生物的生長適應(yīng)范圍進(jìn)行調(diào)節(jié)。ER培養(yǎng)基 不含蔗糖不含瓊脂培養(yǎng)基細(xì)菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基:牛...
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,可完全由無機(jī)鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴(yán)格操作,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機(jī)鹽的合成培養(yǎng)基,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì),其中的個別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營養(yǎng)物,成為半合成培養(yǎng)基,如百日咳...
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)區(qū)分:1.液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基,又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。經(jīng)過無菌處理的培養(yǎng)基能保證無細(xì)菌污染。磷酸鹽緩沖液(ph6.0)培養(yǎng)基L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長的必...
天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復(fù)雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長、染色及細(xì)胞背景下的細(xì)胞培養(yǎng)等方面。維生素K1溶液培養(yǎng)基長時間高溫還會引...