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RIP實驗步驟通常包括: 1. 細胞收集與交聯(lián):培養(yǎng)細胞至適當密度。使用交聯(lián)劑(如甲醛)進行交聯(lián),以固定蛋白質(zhì)-RNA復合物。 2. 細胞裂解:收集細胞并進行裂解,釋放RNA-蛋白質(zhì)復合物。在裂解過程中添加蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)降解。 ...
“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的結(jié)合蛋白,進行小規(guī)模的蛋白質(zhì)親和純化的實驗。更確切地說,IP是采用固定在微珠支持物(一般是瓊脂糖樹脂)上的特定抗體,從復雜的混合物中,純化單一抗原的實驗。固定化蛋白質(zhì)復合物的組裝既可以分步進行,也可以一步完成。 ...
免疫沉淀技術(Immunoprecipitation,簡稱IP)是一種生物化學方法,它利用特異性抗體對抗原進行親和純化。在含有目的抗原的細胞裂解液中加入特定的抗體以及Protein A/G-Beads(預先將Protein A/G固定結(jié)合在磁珠上),根據(jù)抗...