免疫沉淀技術(shù)的實驗方法通常包括以下步驟： 1. 樣本準(zhǔn)備 2. 細胞裂解：使用裂解緩沖液（含有蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)降解）裂解細胞，釋放蛋白質(zhì)。 3. 蛋白質(zhì)濃度測定：使用BCA、Bradford或Lowry等方法測定裂解液中蛋白質(zhì)的濃...

支原體檢測中的PCR法和LAMP方法各有其優(yōu)勢和劣勢，以下是兩種方法的比較： PCR法 優(yōu)勢: 1.高靈敏度：PCR法可以擴增支原體DNA，具有很高的靈敏度。 2.操作簡便：PCR操作相對簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，速度快，通常3個小...

免疫沉淀Co-IP實驗中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實驗情況。 瓊脂糖珠海綿狀的結(jié)構(gòu) (直徑 50-150 μm) 可以結(jié)合抗體 (繼而結(jié)合靶蛋白) ，它能夠直接高效、快速結(jié)合抗體，而不需借助特殊的專業(yè)設(shè)備。瓊脂糖珠呈多孔結(jié)構(gòu)，這使得它們擁...

免疫沉淀實驗不同于WB實驗的樣品制備，對實驗樣品制備要求更高，除了要控制所有操作盡量在冰上完成外，關(guān)鍵的是裂解液的成分，裂解液成分直接決定了樣品質(zhì)量。 主要影響： 1. 蛋白的釋放：許多目的蛋白定位在細胞器，質(zhì)膜，細胞核，細胞骨架中，但通常這些...

支原體檢測的樣本既可以是細胞，也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問題，因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時，病毒類疫苗的病毒收...

ChIP實驗的基本步驟包括： 1. 交聯(lián)（Crosslinking）：細胞被甲醛等交聯(lián)劑處理，使得蛋白質(zhì)和DNA之間的相互作用被固定，形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物。 2. 細胞裂解：裂解細胞，釋放染色質(zhì)，同時保持蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物的完整性。...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實驗是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的技術(shù)。以下是ChIP實驗的實驗設(shè)計概述： 1. 目標(biāo)蛋白的選擇：確定您想要研究的目標(biāo)蛋白，例如特定的轉(zhuǎn)錄因子或組蛋白修飾。 2. 樣本的準(zhǔn)備：根據(jù)研究的需要選擇合適的細胞或組織...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過...

免疫沉淀實驗中抗體的選擇非常關(guān)鍵，因為抗體的特異性和親和力直接影響到實驗的成功與否。 1. 特異性：抗體應(yīng)當(dāng)對目標(biāo)蛋白具有高度的特異性，以避免與其他蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合，導(dǎo)致假陽性結(jié)果。 2. 親和力：抗體對目標(biāo)蛋白的親和力要足夠高，以確保在免...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在...

RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的實驗設(shè)計需要考慮多個方面，以確保實驗的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。 1. 目標(biāo)蛋白的選擇：確定你想要研究的目標(biāo)RNA結(jié)合蛋白（RBP）。 2. 陽性和陰性對照...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實驗是一種強大的技術(shù)，用于研究蛋白質(zhì)與DNA之間的相互作用，尤其是在轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、復(fù)制以及表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域。然而，像所有實驗技術(shù)一樣，ChIP實驗也有其優(yōu)點和缺點。 ChIP實驗的優(yōu)點： 1. 體內(nèi)反應(yīng)的反映：C...

方法 靈敏度 優(yōu)勢 劣勢 ...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實驗是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的技術(shù)。以下是ChIP實驗的實驗方法概述： 1. 交聯(lián)：將細胞與交聯(lián)劑（如1%甲醛）孵育，通常在室溫下進行10-15分鐘。 2. 終止交聯(lián)：添加甘氨酸以終止交聯(lián)反應(yīng)，孵育5分鐘。...

支原體預(yù)防的策略主要包括以下幾個方面： 1. 控制污染源：通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在，從而獲得準(zhǔn)確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù)：通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識，避免在細胞培養(yǎng)過程中引入...

支原體污染的來源主要包括以下幾個方面： 1. 實驗室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。 2. 實驗操作人員的手部、衣物或皮膚表面可能攜帶支原體，造成細胞培養(yǎng)的污染。 3. 培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料如果受...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）在生物醫(yī)學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用，以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域： 1. 蛋白質(zhì)相互作用研究：IP技術(shù)可以用來研究蛋白質(zhì)之間的相互作用，揭示蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò)。 2...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實驗設(shè)計通常包括以下幾個關(guān)鍵步驟： 1. 目標(biāo)蛋白質(zhì)的選擇： 2. 抗體的選擇：選擇特異性強、親和力高的抗體來捕獲目標(biāo)蛋白質(zhì) 3. 樣本的準(zhǔn)備：收集和準(zhǔn)備細胞或組織...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在...

支原體去除的原理通常涉及以下幾個方面： 1. 抗*素作用：使用特定的抗*素制劑來抑制支原體的生長和繁殖。例如，含有喹諾酮類、四環(huán)素衍生物類和大環(huán)內(nèi)酯類抗*素的混合制劑，這些抗*素能夠抑制支原體的DNA和蛋白合成。 2. 破壞細胞膜：支原體去...

支原體污染和黑膠蟲污染是兩種不同類型的細胞培養(yǎng)污染，它們具有各自的特點和區(qū)別： 支原體污染：在相差顯微鏡下，支原體呈暗色微小顆粒位于細胞表面和細胞之間。 黑膠蟲污染：在高倍鏡下，被黑膠蟲污染的細胞膜會變得模糊不清，邊界不清晰，有粗糙感。 ...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過...

RIP 技術(shù)的原理（RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay，RNA 結(jié)合蛋白免疫沉淀）主要是運用針對目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來，經(jīng)過分離純化就可以對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA 進行q-PCR...

細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，可以采取以下一些方法嘗試去除污染： 1. 抗*素治*：使用針對支原體有效的抗*素，如四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類等。根據(jù)搜索結(jié)果，可以加入高濃度抗*素進行沖擊治*，例如慶大霉素 200ug/ml，四...

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陽性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 擴增產(chǎn)物污染：PCR擴增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理，極微量的污染就可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。 2. 引物設(shè)計不當(dāng)：引物設(shè)計不夠特異性，可能會與非目標(biāo)序列發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致非特異性擴增。 ...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實驗步驟通常包括以下幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)： 1. 細胞裂解：首先需要收集細胞并裂解它們，以釋放細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。這通常通過添加含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液來完成，以防止蛋白質(zhì)降解。 2. 裂...

免疫沉淀（immunoprecipitation）是指利用抗體可與抗原特異性結(jié)合的特性，將抗原（常為靶蛋白）從混合體系沉淀下來，初步分離靶蛋白的一種方法。免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一種在體外探測兩個蛋白分子間是否存在...

需要定期檢測支原體污染的客戶主要包括以下幾類： 1. 生物醫(yī)藥企業(yè)：生產(chǎn)涉及細胞培養(yǎng)的生物制品的公司，包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。 2. 細胞公司：進行細胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè)，需要確保所用細胞的安全性和有效性。 3. 科研機...

細胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點： 1. 無細胞壁結(jié)構(gòu)：支原體是沒有細胞壁的微生物，這使得許多作用于細胞壁的抗*素對支原體無效。 2. 微小體積：支原體體積小，能夠穿過常規(guī)的除菌濾膜，例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜...

免疫沉淀是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯(lián)的珠子（agarose或Sepharose）孵育，通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復(fù)合物，沉...