支原體去除后對(duì)細(xì)胞檢測(cè)的影響主要取決于去除方法和去除后的處理。以下是一些可能的影響： 1. 去除方法的影響：不同的支原體去除方法可能對(duì)細(xì)胞檢測(cè)產(chǎn)生不同的影響。例如，一些去除方法可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的代謝和增殖產(chǎn)生暫時(shí)性的影響，這可能會(huì)影響某些類型的細(xì)胞檢測(cè)。...

免疫沉淀實(shí)驗(yàn)不同于WB實(shí)驗(yàn)的樣品制備，對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品制備要求更高，除了要控制所有操作盡量在冰上完成外，關(guān)鍵的是裂解液的成分，裂解液成分直接決定了樣品質(zhì)量。 主要影響： 1. 蛋白的釋放：許多目的蛋白定位在細(xì)胞器，質(zhì)膜，細(xì)胞核，細(xì)胞骨架中，但通常這些...

支原體去除試劑在清*支原體的過(guò)程中可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過(guò)與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過(guò)...

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響，具體包括： 1. 細(xì)胞生長(zhǎng)受影響：支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢，甚至停滯。 2. 細(xì)胞形態(tài)改變：支原體感*的細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)形態(tài)的改變，如細(xì)胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。 3. 細(xì)胞...

細(xì)胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測(cè)的原因主要有以下幾點(diǎn)： 1. 支原體污染率高：常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染率保守估計(jì)在15-35%之間。 2. 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果：支原體污染會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，影響培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)和生理特征。 3. 難以用光學(xué)顯...

細(xì)胞培養(yǎng)中，需要去除支原體的污染：支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中 普遍的問(wèn)題之一，細(xì)胞庫(kù)中或正在使用的細(xì)胞中，支原體的污染率約為15%-35%。并對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的生理和代謝造成諸多影響： 01/ 爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng) – 阻礙細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖 02/ 改變蛋白質(zhì)、...

ChIP技術(shù)的應(yīng)用： 1. 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的鑒定：研究特定轉(zhuǎn)錄因子在基因組上的結(jié)合模式。 2. 組蛋白修飾的分布：分析不同組蛋白修飾在基因組上的分布情況，這些修飾與基因的活躍或沉默有關(guān)。 3. DNA甲基化研究：結(jié)合ChIP技術(shù)可以研究...

Co-IP的實(shí)驗(yàn)步驟： 1. 細(xì)胞裂解：首先，細(xì)胞或組織被裂解，釋放其中的蛋白質(zhì)。 2. 抗體結(jié)合：然后，將特異性抗體（針對(duì)已知蛋白質(zhì)之一的抗體）加入到裂解物中。這些抗體會(huì)特異性地結(jié)合到目標(biāo)蛋白（誘餌蛋白）上。 3. 免疫復(fù)合物形成：抗體...

Co-IP的優(yōu)勢(shì)： 1. 生理相關(guān)性：Co-IP可以在接近生理?xiàng)l件的條件下捕獲蛋白質(zhì)相互作用。 2. 特異性：使用特異性抗體可以提高實(shí)驗(yàn)的特異性。 3. 廣泛應(yīng)用：Co-IP技術(shù)適用于多種樣本類型，包括細(xì)胞培養(yǎng)、組織樣本等。 Co-...

免疫沉淀技術(shù)RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的實(shí)驗(yàn)方法基于以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟： 1. 細(xì)胞裂解：首先，細(xì)胞或組織樣本被裂解，以釋放細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和RNA復(fù)合物。 2.抗體特異性結(jié)合：裂解后的樣本中加入針對(duì)特...

免疫沉淀是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細(xì)胞裂解液或表達(dá)上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯(lián)的珠子（agarose或Sepharose）孵育，通過(guò)離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復(fù)合物，沉...

細(xì)胞被支原體污染后可能會(huì)出現(xiàn)以下幾種情況： 1. 生長(zhǎng)速度變慢：支原體污染的細(xì)胞生長(zhǎng)速度可能會(huì)減慢，甚至停止生長(zhǎng)。 2. 形態(tài)改變：部分細(xì)胞可能會(huì)變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細(xì)胞在支原體污染后，形態(tài)變化可能不明顯，但有些細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)體積增大、細(xì)...

檢測(cè)新鮮培養(yǎng)基是否有支原體污染，可以采用以下五種方案： 1. 培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)且可靠的方法，通過(guò)將培養(yǎng)基接種到適宜支原體生長(zhǎng)的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上，觀察是否有支原體生長(zhǎng)。這種方法較為耗時(shí)，但成本較低。 2. 熒光染色法：使用特定的熒光染...

支原體檢測(cè)的樣本既可以是細(xì)胞，也可以是培養(yǎng)基。在細(xì)胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問(wèn)題，因此需要對(duì)細(xì)胞和培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)胞庫(kù)、病毒種子批、對(duì)照細(xì)胞以及臨床用細(xì)胞等都需要進(jìn)行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時(shí)，病毒類疫苗的病毒收...

免疫沉淀是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細(xì)胞裂解液或表達(dá)上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯(lián)的珠子（agarose或Sepharose）孵育，通過(guò)離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復(fù)合物，沉...

免疫沉淀（IP）實(shí)驗(yàn)中抗體的選擇非常關(guān)鍵，因?yàn)榭贵w的特異性和親和力直接影響到實(shí)驗(yàn)的成功與否。 1. 特異性：抗體應(yīng)當(dāng)對(duì)目標(biāo)蛋白具有高度的特異性，以避免與其他蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。 2. 親和力：抗體對(duì)目標(biāo)蛋白的親和力要足夠高，以...

支原體檢測(cè)的應(yīng)用場(chǎng)景非常廣*，以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域： 1. 細(xì)胞培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)室和生物制品工廠中，細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程容易受到支原體污染。支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞功能改變，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和生物制品的質(zhì)量。因此，支原體檢測(cè)在細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量控制中至關(guān)重要。科研中...

免疫沉淀技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方法通常包括以下步驟： 1. 樣本準(zhǔn)備 2. 細(xì)胞裂解：使用裂解緩沖液（含有蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)降解）裂解細(xì)胞，釋放蛋白質(zhì)。 3. 蛋白質(zhì)濃度測(cè)定：使用BCA、Bradford或Lowry等方法測(cè)定裂解液中蛋白質(zhì)的濃...

支原體是一類細(xì)菌，由于缺乏細(xì)胞壁，具有靈活的膜結(jié)構(gòu)。這使得支原體的形態(tài)多變，很難在高倍顯微鏡下識(shí)別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水，對(duì)許多針對(duì)細(xì)胞壁合成的常見抗*素具有抗性。它們的體積非常小，直徑通常在0.15~0.3μm，因此能夠輕易地穿過(guò)過(guò)濾系統(tǒng)...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進(jìn)行的核酸擴(kuò)增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測(cè)有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在...

免疫沉淀Co-IP實(shí)驗(yàn)中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實(shí)驗(yàn)情況。 瓊脂糖珠海綿狀的結(jié)構(gòu) (直徑 50-150 μm) 可以結(jié)合抗體 (繼而結(jié)合靶蛋白) ，它能夠直接高效、快速結(jié)合抗體，而不需借助特殊的專業(yè)設(shè)備。瓊脂糖珠呈多孔結(jié)構(gòu)，這使得它們擁...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）是一種用于研究蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)復(fù)合物組成以及特定蛋白質(zhì)的表達(dá)和純化的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 基本原理 免疫沉淀技術(shù)基于抗體與特定蛋白質(zhì)（抗原）之間的特異性相互作用。通過(guò)使用針對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的...

免疫沉淀（RIP）實(shí)驗(yàn)中抗體的選擇非常關(guān)鍵，因?yàn)榭贵w的特異性和親和力直接影響到實(shí)驗(yàn)的成功與否。 1. 特異性：抗體應(yīng)當(dāng)對(duì)目標(biāo)蛋白具有高度的特異性，以避免與其他蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。 2. 親和力：抗體對(duì)目標(biāo)蛋白的親和力要足夠高，...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實(shí)驗(yàn)是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的技術(shù)。以下是ChIP實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法概述： 1. 交聯(lián)：將細(xì)胞與交聯(lián)劑（如1%甲醛）孵育，通常在室溫下進(jìn)行10-15分鐘。 2. 終止交聯(lián)：添加甘氨酸以終止交聯(lián)反應(yīng)，孵育5分鐘。...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation，簡(jiǎn)稱IP）是一種生物化學(xué)方法，它利用特異性抗體對(duì)抗原進(jìn)行親和純化。在含有目的抗原的細(xì)胞裂解液中加入特定的抗體以及Protein A/G-Beads（預(yù)先將Protein A/G固定結(jié)合在磁珠上），根據(jù)抗...

在科研中，支原體檢測(cè)是確保細(xì)胞培養(yǎng)純凈性的重要環(huán)節(jié)。以下是一些在科研中常見的支原體檢測(cè)方法： 1. 支原體培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，通過(guò)將細(xì)胞培養(yǎng)物接種到特定的培養(yǎng)基中，觀察是否有支原體生長(zhǎng)。這是直接的檢測(cè)方法，但耗時(shí)較長(zhǎng)，通常需要數(shù)周時(shí)間。...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實(shí)驗(yàn)方法通常包括以下步驟： 1. 樣本準(zhǔn)備 2. 蛋白質(zhì)濃度測(cè)定：使用BCA、Bradford或Lowry等方法測(cè)定裂解液中蛋白質(zhì)的濃度。 3. 抗體預(yù)處理：如果使用預(yù)固定的...

細(xì)胞庫(kù)支原體檢測(cè)的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面： 1. 確保細(xì)胞庫(kù)的質(zhì)量與安全性：細(xì)胞庫(kù)的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞。支原體檢測(cè)是確保細(xì)胞庫(kù)中細(xì)胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。 2. 符合監(jiān)管要求：支原體檢測(cè)是生物制...

對(duì)于同一個(gè)樣品，如果一步法恒溫試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，而PCR檢測(cè)為陰性，可能的原因包括： 1. 檢測(cè)的支原體種類不同：一步法恒溫試劑盒可能檢測(cè)的支原體種類更多，例如可以涵蓋27種支原體，而PCR檢測(cè)可能只針對(duì)常見的12種支原體進(jìn)行檢測(cè)。因此，如果樣品...

支原體的預(yù)防可通過(guò)以下方式： 1. 控制污染源：通過(guò)定期檢測(cè)和去除細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)無(wú)支原體存在，從而獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 2. 改善無(wú)菌操作技術(shù)：通過(guò)提高實(shí)驗(yàn)人員的操作技術(shù)和意識(shí)，避免在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中引入支原體污染...