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來源: 發(fā)布時間:2024-10-22

RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內,多數(shù)的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質,但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應的病菌傳染,傳染的程度及病菌是否仍在大量復制。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。RNA提取試劑:TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。上海正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨

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RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差~蕪湖RNA提取試劑平均價格再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield,可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質。

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植物、動物、人類都存在RNA干擾現(xiàn)象,這對于基因表達的管理、參與對病菌傳染的防護、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾是一個生物過程,在這個過程中雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達。自1998年發(fā)現(xiàn)以來,RNA干擾已經作為一種強大的“基因沉默”技術而出現(xiàn)。RNA干擾作為研究基因運行的一種研究方法已被普遍應用于基礎科學,它可能在將來產生更多更新的醫(yī)治方法。科學家認為,RNA干擾技術不僅是研究基因功能的一種強大工具,不久的未來,這種技術也許能用來直接從源頭上讓致病基因“沉默”,以醫(yī)治病癥甚至一些病,在農業(yè)上也將大有可為。

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法:1、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過程中導致的降級;應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取,采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存,并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料,提取過程盡可能的快,提取后的RNA應置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進行凝膠電泳檢測,則應提取好后立刻進行電泳,電泳緩沖液應更換新配制的。2、鹽及有機溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,洗滌液中含有乙醇,在提取過程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒有充分晾干導致的,殘留的鹽及有機溶劑對后續(xù)的逆轉錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,因此在提取過程中應充分去除組織裂解液,洗滌時應充分,使管壁四周均能被洗滌到,另外管子空離和吹風是必須的步驟,會進一步降低有機物殘留。他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到較低程度。

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眾所周知,RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬,不易被化學和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,會快速降解RNA。為了使之較小化,較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而,這些方法也有缺點,如核酸的凍融損傷,并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法。排除其它核酸分子(DNA)的污染。南京貴陽RNA提取試劑

RNA提取試劑注意事項:有機相用異丙醇沉淀可回收蛋白。上海正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示,公司的產品質量已經達到甚至超過了進口產品的質量上海正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨