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改良高氏二號(hào)培養(yǎng)基的pH值對(duì)放線菌生長(zhǎng)有影響。放線菌通常偏好中性或微堿性的環(huán)境,一般適pH值在7.0到7.4之間。pH值的高低會(huì)直接影響放線菌的代謝活動(dòng)、酶的活性以及細(xì)胞膜的穩(wěn)定性。當(dāng)pH值低于或高于這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)抑制放線菌的生長(zhǎng),甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。例如,在酸性條件下,細(xì)胞可能會(huì)失去能量產(chǎn)生效率,因?yàn)檫^(guò)多的質(zhì)子會(huì)干擾細(xì)胞內(nèi)的pH穩(wěn)態(tài)和代謝途徑。而在過(guò)于堿性的條件下,放線菌的酶活性可能會(huì)受到抑制,影響其正常的生長(zhǎng)和繁殖。在實(shí)驗(yàn)室條件下,通常會(huì)在配制培養(yǎng)基后調(diào)節(jié)pH至放線菌的適生長(zhǎng)范圍,并通過(guò)高壓滅菌確保培養(yǎng)基無(wú)菌。之后,在冷卻到適宜溫度時(shí)傾入無(wú)菌平皿中,用于放線菌的培養(yǎng)。如果培養(yǎng)基的pH值在滅菌過(guò)程中發(fā)生變化,可能需要在滅菌后進(jìn)行重新調(diào)整。了解和控制pH值對(duì)于優(yōu)化放線菌的培養(yǎng)條件至關(guān)重要,尤其是在進(jìn)行大規(guī)模發(fā)酵或抗生物質(zhì)生產(chǎn)等工業(yè)應(yīng)用時(shí)。此外,不同的放線菌種類可能對(duì)pH值的偏好有所不同,因此在培養(yǎng)特定菌株時(shí),可能需要調(diào)整pH值以適應(yīng)其生長(zhǎng)需求。對(duì)于微生物的生化反應(yīng)篩選,TSI 培養(yǎng)基具有較高的特異性和敏感性,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。Tinsdale瓊脂基礎(chǔ)
腦心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基(BrainHeartInfusionBroth,簡(jiǎn)稱BHI)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**營(yíng)養(yǎng)豐富**:BHI培養(yǎng)基含有牛腦浸粉和牛心浸粉,提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,適合培養(yǎng)各種細(xì)菌,包括營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物。2.**成分**:典型的BHI培養(yǎng)基配方包含胰蛋白胨、牛腦浸出粉、牛心浸出粉、氯化鈉、葡萄糖和磷酸氫二鈉等成分,這些成分共同維持培養(yǎng)基的滲透壓和pH值,確保微生物的良好生長(zhǎng)。3.**pH緩沖**:磷酸氫二鈉作為pH緩沖劑,幫助維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定,通常pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**應(yīng)用廣**:BHI培養(yǎng)基不僅用于細(xì)菌的培養(yǎng),還適用于霉菌、酵母等其他微生物的培養(yǎng)。它特別適用于礦泉水和城市供水中糞性鏈球菌濾膜法的確證性實(shí)驗(yàn)。5.**制備方法**:將BHI培養(yǎng)基的粉末溶解在蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘,然后備用。6.**質(zhì)量控制**:BHI培養(yǎng)基在質(zhì)控實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出對(duì)多種菌株的良好支持,如糞腸球菌、屎腸球菌、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌和大腸埃希氏菌等,這些菌株在BHI培養(yǎng)基上能夠良好生長(zhǎng)并表現(xiàn)出特定的生長(zhǎng)特征。BBM瓊脂培養(yǎng)基能直觀呈現(xiàn)細(xì)菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣及產(chǎn)生硫化氫的情況,TSI 培養(yǎng)基在細(xì)菌特性研究中不可或缺。
膽汁七葉苷瓊脂(BileEsculinAgar,簡(jiǎn)稱BE瓊脂)是一種用于微生物學(xué)研究的選擇性培養(yǎng)基,特別適用于腸球菌和鏈球菌(尤其是血清組D)的分離和鑒定。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**選擇性成分**:含有膽汁和七葉苷,膽汁能夠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),而七葉苷作為一種指示劑,可以被特定的細(xì)菌水解生成七葉內(nèi)酯,后者與培養(yǎng)基中的鐵離子反應(yīng)產(chǎn)生棕黑色沉淀,有助于菌落的鑒別。2.**營(yíng)養(yǎng)成分**:通常包含肉浸粉、蛋白胨、牛膽汁、檸檬酸鐵和瓊脂等,為細(xì)菌提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)環(huán)境。3.**pH調(diào)節(jié)**:pH值通常控制在7.2±0.2,以保證細(xì)菌的適宜生長(zhǎng)條件。4.**應(yīng)用范圍**:主要用于食品和藥品中腸球菌和鏈球菌的初步鑒定,也用于從臨床樣本中分離這些菌種。5.**培養(yǎng)條件**:通常在35oC下培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察菌落的生長(zhǎng)情況和是否產(chǎn)生棕黑色變。6.**菌落特征**:腸球菌和某些鏈球菌在BE瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),能夠產(chǎn)生棕黑色的菌落,這是由于七葉苷被水解并產(chǎn)生沉淀所致。
胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)是一種通用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種微生物的培養(yǎng)。以下是TSB的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**成分**:TSB的主要成分包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。這些成分提供微生物所需的氮源、維生素、生長(zhǎng)因子、碳源、緩沖劑和滲透壓維持劑。2.**pH值**:TSB的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃)。3.**制備方法**:稱取TSB培養(yǎng)基30.0g,加熱攪拌溶解于1000ml純化水中,分裝于試管或其他容器中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**應(yīng)用**:TSB培養(yǎng)基用于藥品及生物制品的無(wú)菌測(cè)試及藥品微生物限度檢查中供試品的稀釋或增菌。它特別適合于無(wú)菌工藝環(huán)境中源自人體的細(xì)菌、芽孢和菌的培養(yǎng)。5.**質(zhì)量控制**:按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉等,放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。6.**儲(chǔ)存條件**:TSB培養(yǎng)基應(yīng)貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;未開封產(chǎn)品保質(zhì)期三年。LB瓊脂(Miller)是一種用于細(xì)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E. coli)等革蘭氏陰性菌的培養(yǎng)。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于水或其他樣品中腸球菌分離或計(jì)數(shù)的培養(yǎng)基,特別適用于濾膜法檢測(cè)。以下是其主要特點(diǎn):1.**成分**:該培養(yǎng)基包含胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)等成分,為腸球菌提供碳源、氮源并抑制其他細(xì)菌生長(zhǎng),同時(shí)TTC作為顯色劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),以適應(yīng)腸球菌的生長(zhǎng)需求。3.**選擇性**:疊氮化鈉在培養(yǎng)基中起到抑制非目標(biāo)細(xì)菌生長(zhǎng)的作用,特別是對(duì)革蘭氏陰性菌有較好的抑制效果。4.**指示性**:TTC作為顯色劑,當(dāng)腸球菌生長(zhǎng)并代謝時(shí),能夠?qū)TC還原成紅色的三苯甲月替,使菌落呈現(xiàn)紅色,便于識(shí)別。5.**應(yīng)用**:主要用于水和液體樣品中腸球菌的分離和計(jì)數(shù),適用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品衛(wèi)生檢測(cè)。6.**制備方法**:通常稱取培養(yǎng)基42.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,冷卻至45-50℃時(shí)傾入無(wú)菌平皿備用,無(wú)需高壓滅菌。7.**儲(chǔ)存條件**:建議在陰涼干燥處儲(chǔ)存,保質(zhì)期通常為三年。8.**質(zhì)量控制**:使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的選擇性和指示性特點(diǎn)。濾膜腸球菌瓊脂因其選擇性和指示性特點(diǎn),在微生物檢測(cè)和分類中發(fā)揮著重要作用。SIM培養(yǎng)基中的硫酸鐵銨在細(xì)菌產(chǎn)生的硫化氫作用下生成黑色的硫化鐵沉淀。蔗糖硫胺培養(yǎng)基
在使用MEE肉湯進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,需要進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。Tinsdale瓊脂基礎(chǔ)
GC肉湯基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)苛養(yǎng)菌,特別是淋球菌和嗜血桿菌等的微生物培養(yǎng)基。其特點(diǎn)主要包括:1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:GC肉湯基礎(chǔ)含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鈉等成分,為微生物提供必需的營(yíng)養(yǎng)。這些成分有助于維持微生物生長(zhǎng)所需的能量和合成代謝物質(zhì)。2.**pH值**:GC肉湯基礎(chǔ)的pH值通??刂圃?.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性添加劑**:為了提高培養(yǎng)基的選擇性,可以添加抗生物質(zhì)添加劑,如VCN添加劑(V.C.N.Supplement)、VCNT添加劑(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制劑(VCAInhibitor)、VCAT抑制劑(VCATInhibitor)、VancloT添加劑、LincoT添加劑等。4.**營(yíng)養(yǎng)添加劑**:為了增加培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)性質(zhì),可以加入維生素添加劑,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加劑(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要稱取一定量的GC肉湯基礎(chǔ)干粉,溶解在蒸餾水中,經(jīng)過(guò)高壓滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,再加入過(guò)濾除菌的血紅蛋白溶液和GC添加劑,混勻后使用。6.**應(yīng)用**:GC肉湯基礎(chǔ)用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無(wú)菌血紅蛋白粉各1支。Tinsdale瓊脂基礎(chǔ)